第四章 生物信息及传递(下)3.pptVIP

第四章 生物信息的传递(下) ——翻译（从mRNA-蛋白质） 4.4 蛋白质合成的生物学机制 4.4.1 氨基酸的活化 氨基酸在进行合成多肽链之前,必须在氨酰-tRNA合成酶的作用下生成活化氨基酸——AA-tRNA。 4.4.2 翻译的起始 蛋白质合成的起始是指在模板mRNA编码区5’端形成核糖体-mRNA-起始tRNA复合物并将甲酰甲硫氨酸放入核糖体P位点。 原核生物中30S小亚基首先与mRNA模板相结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合 真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结合生成80S·mRNA·Met-tRNAMet起始复合物。 起始复合物的生成除了GTP外，还需要Mg2+、NH4+及3个起始因子（IF-1、IF-2、IF-3）。 30S亚基具有专一性的识别和选择mRNA起始位点的性质，IF-3协助该亚基完成这种选择。 Shine及Dalgarno等证明几乎所有原核生物mRNA上都有一个5’-AGGAGGU-3’序列，这个富嘌呤区与30S亚基上16S rRNA 3’末端的富嘧啶区5’-GAUCACCUCCUUA-3’相互补。 SD序列（Shine-Dalgarno sequence) 存在于原核生物起始密码子AUG上游7～12个核苷酸处的一种4～7个核苷酸的保守片段，它与16S rRNA 3’端反向互补，所以可将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。根据首次识别其功能意义的科学家命名。 细菌核糖体上一般存在三个与氨基酰-tRNA结合的位点，即A位点（aminoacyl site），P位点（peptidyl sit）和E位点（Exit site）。只有fMet-tRNAfMet能与第一个P位点相结合，其它所有tRNA都必须通过A位点到达P位点，再由E位点离开核糖体。 三种起始因子 IF-1 IF-2 　 IF-3 辅助IF-3 70S起始复合物生成后促进IF-2释放 有GTP酶活性 特异识别fmet-tRNAfmet 形成fmet-tRNAfmet- IF-2-GTP 是30S起始复合物与50S亚基连接所必须 促进30S小亚基结合mRNA 终止时：促使核糖体解离 2.真核生物翻译的起始 真核生物蛋白质生物合成的起始基本与原核生物相同，只不过其核糖体较大，有较多的起始因子，mRNA具有m7GpppNp帽子结构，Met-tRNAMet不甲酰化，mRNA分子5’端的“帽子”和3’端的多聚A都参与形成翻译起始复合物（图4-14）。 除了帽子结构以外，40S小亚基还能识别mRNA上的起始密码子AUG。Kozak等提出了一个“扫描模型”来解释40S亚基对mRNA起始密码子的识别作用。按照这个模型，40S小亚基先结合在mRNA5‘ 端的任何序列上，然后沿mRNA移动直至遇到AUG发生较为稳定的相互作用，最后与60S亚基一道生成80S起始复合物。 40S小亚基之所以能在AUG处停下，可能是由于Met-tRNAiMet的反密码子与AUG配对的结果。 4. 4. 3 肽链的延伸 生成起始复合物，第一个氨基酸（fMet/Met-tRNA）与核糖体结合以后，肽链开始伸长。按照mRNA模板密码子的排列，氨基酸通过新生肽键的方式（图4-16）被有序地结合上去。 肽链延伸中的每个循环都包括 AA-tRNA与核糖体结合 肽键的生成 移位 图4-17细菌中肽链延伸的第一步反应：第二个氨基酰-tRNA的结合。该氨基酰-tRNA首先与EF-Tu·GTP形成复合物，进入核糖体的A位，水解产生GDP并在EF-Ts的作用下释放GDP并使EF-Tu结合另一分子GTP，进入新一轮循环。 由于EF-Tu只能与fMet-tRNA以外的其他AA-tRNA起反应，所以起始tRNA不会被结合到A位上，mRNA内部的AUG不会被起始tRNA读出，肽链中间不会出现甲酰甲硫氨酸。 图4-18细菌中肽链延伸的第二步反应：肽键的生成。 在核糖体·mRNA·AA-tRNA复合物中，AA-tRNA占据A位，fMet-tRNAfMet占据P位。 在50S亚基上肽基转移酶（peptidyl transferase）的催化下，P位的肽（氨）酰-tRNA把肽（或氨酰基）转给A位的AA-tRNA，并以肽键相连 。 起始tRNA在完成使命后离开核糖体P位点，A位点准备接受新的AA-tRNA，开始下一轮合成反应。 图4-18细菌中肽链延伸的第三步反应：移位。核糖体通过EF-G介