IL-18及PDTC对肾小球系膜细胞增殖和分泌影响.pdf

郑州人学2007年硕}研究，l论文 IL—18及PDTC对肾小球系膜细胞增殖种分泌的影响 因了-rB(NF4cB)的激活情况。 【结果】 1．原代培养MC，消化接种的肾小球残体第3～5天有50％～60％贴壁，第7 天可见细胞移出，此后，肾小球残体大部分瓦解，结构消失。肾小球系膜细胞占优 势，上皮细胞基本消失，3～4周后，系膜细胞长满瓶底，此时可进行传代。传代培 养的系膜细胞24小时内全部贴壁，生长迅速，7～10天长满瓶底，倒置显微镜下观 察MC呈梭形或星形，细胞核呈圆形或卵圆形，胞质向外伸出较多长短不一的突起。 免疫细胞化学sP法鉴定培养的细胞抗结蛋白、抗洳平滑肌肌动蛋白单抗染色阳性， 抗细胞角蛋白、抗Ⅷ因子相关抗原单抗染色阴性。表明培养的细胞为肾小球系膜细 胞。 组与A组相比，两组的彳值差别无统计学意义(P0．05)而E组低于B组(P 3．在单纯IL．18作用组中，随着IL。18浓度的升高，上清液中CO-IV的含量逐 渐增多，与对照组相比较，差异有统计学意义(PO．01)，50峙，L组与2599／L组相 D组与A组相比差别无统计学意义(PO．05)。E组低于B组，F组低于C组，差 系膜细胞分泌CO-Ⅳ和LN。 后均有TNF．nmRNA表达，与对照组相比较差别有统计学意义(户O．01)，且后者 mRNA。IL—18处理组 明显高于前者(PO．01)，说明IL．18能诱导MC表达TNF--a 111 jlIf州人学2007年硕十研究m论文 lL．18及PDTC村肾小球系JIf{细胞增贿用1分泌的影响 加PDTC后TNF．a 诱导的TNF．ⅡmRNA表达。 5．采用免疫细胞化学sP法检测NF-·cBP65的表达情况，镜下NF．KBP65阳性 细胞以细胞核染色为主，间有细胞浆染色，NF-rBP65阴性细胞则以细胞浆染色为 主，问有细胞核染色，呈棕黄色，并可见棕黄色颗粒沉积。对照组和D组细胞核内 NF-rB p65表达阴性；25p．g／L组及50p．g／L组与对照组比较，细胞核内NF—r．Bp65 p65表达明显减弱，核着色大大减少，而胞浆着色增多。 【结论】 1．高糖环境下，不同浓度的lL-18可明显诱导舵增殖，并随浓度增加，托增 殖明显增强，PDTC能抑制TL一18诱导的Mc增殖。 2．体外高糖环境下，IL—18可诱导Mc分泌co一Ⅳ、l。N，且PDTC能强烈抑制这 一过程。 3．不同浓度的IL-18可促使体外高糖环境下培养的Mc内表达TN卜a，并可被 PDTC强烈抑制。 B 4．11718可活化NF-KP65，使其由胞浆向胞核内转移，PDTC可使这一过程 减弱。 5．IL一18可能通过NF-KB激活途径影响MC增殖、分泌CO-IV、LN和TNF—a 的表达而参与DN的发生、发展，抗氧化剂PDTC能强烈抑制这一过程。 【关键词】：吡略烷二硫代氨摹甲酸盐 白细胞介素一18糖尿病肾病肾小球 系膜细胞增殖细胞外基质肿瘤坏死因子一。 核转录因子r．B lv 郑州人q-2007干硕}。研究，l论文 IL．18及PDTC埘肾小球系膜细胞增殖单}分泌的影响 ofIL-18andPDTCon The andserectioneffects proliferation cells mesangiai He PostgraduateCandidate：Zhang Tutor：Pro￡Qin Guijun and