目标区域测序诊断RB1突变导致的视网膜变性.pdfVIP

第 36卷第6期 同济大 学学 报 (医学 版 ) Vo1．36NO．6 2015年 12月 JOURNALOFTONGJIUNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE) Dec．，2015 doi：10．16118／j．1008—0392．2015．06．003 ·基础 研 究 · 目标区域测序诊断CRB1突变导致的视网膜变性 王 敏 ，王 娟 ，徐 鼎 ，吕立夏 ，王 方 ，徐 国彤 ， (1．同济大学医学院眼科研究所临床视觉科学实验室，上海 200092；2．同济大学附属第十人民医院眼科，上海 200072 3．同济大学医学院再生医学系生物化学与分子生物学教研室 ，上海 200092) 【摘要】目的 研究一例疑是视网膜变性的患儿，进行基因检测并作出明确的基因诊断。方法 常规检查患儿和 家属的眼睛，特别是视网膜的情况。收集患者及家庭成员的外周静脉血液，提取基因组DNA。通过 目标区域外显 子组序列捕获联合新一代测序 (简称 目标区域测序)，利用生物信 息学分析筛选出一系列可能的突变，再通过 Sanger测序和共分离研究进行验证，从而确定先证者的致病突变。最后，通过PCR和 Sanger测序检测突变基因。 结果 患儿视力障碍严重，眼底检查所见符合视网膜变性。其他人眼睛正常。基因诊 断结果表明，先证者携带 CRB1基因的复合杂合性致病突变 (C．3521GC和 C一141—1142insTGGCT)。这两个突变分别来源于父亲 (C． 3521GC，P．C1174S)和母亲(C一141—1142insTGGCT)，为隐性遗传。患儿的弟弟(新生儿)只有一个C．1141—1142 insTGGCT突变，表明他不会发病。建议新生几长大后在生育前要进行遗传检查和咨询。结论 目标区域测序的 基因诊断方法是检测视网膜变性疾病突变基因的强大工具，有利于对患者做 出早期、明确、分子水平的诊 断，在特 定疾病的理解、预防和预后判定方面能发挥重要作用。同时为其尚无法做临床检查和诊断的新生儿弟弟进行了基 因诊断，通过预测，排除了发病的可能。 【关键词】基因诊断；目标区域测序；CRB1基因；视网膜变性 【中图分类号】R15211 【文献标志码】A 【文章编号】1008—0392(2015)06—0013—06 GeneticdiagnosisofCRB1mutationsinretinaldegenerative diseasesbytargetexon sequencing WANGM in ，WANG Juan ，XU Ding ，LV Li—xia ，WANG Fang ，XU Guo．tong，’ (1．LaboratoryofClinicalVisionScience，TongjiEyeInstitute，TongjiUniversity，Shanghai200092，China； 2．Dept．ofOphthalmology，TenthPeople’SHospital，TongjiUniversity，Shanghai200072，China； 3．TeachingandResearchSectionofBiochemistryandMoleculra Biology，RegenerativeM edicine， MedicalCollege，TongjiUniversity，Shnaghai200092，China) 【Abstract】Objective ToinvestigategeneticdiagnosisofCRB1mutationsinretinaldegenerationby targetexonsequencing．Methods A3-yearchildwithsuspectedLeber’scongenitalamaurosis(LCA) and3familymemberswerein