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脂肪酶的作用原理与应用领域;内容;脂肪酶（lipase）又称甘油酯水解酶，是指分解或合成高级脂肪段和丙三醇形成的甘油三酸酯酯键的酶。 ;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;脂肪酶是一类特殊的酯键水解酶，只作用于异相系统，即只在油水界面上作用，而且只有在当底物以微粒，小聚合分散状态或呈乳化颗粒时，脂肪酶对底物水解才有显著的催化作用。;脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;脂肪酶催化的反应 ;脂肪酶的来源： 脂肪酶广泛存在于动物植物和微生物中。 植物中含脂肪酸较多的是油料作物的种子，当油料种子发芽时，脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类，提供种子生根发芽所必须的养料和能量； ;动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织，在肠液中含有少量的脂肪酶，在动物体内，各类脂肪酶控制消化，吸收，脂肪重建和蛋白质代谢等过程；;细菌，真菌和酵母中的脂肪酶含量更为丰富。由于微生物种类多，繁殖快，易发生遗传变化，具有动植物更广的作用，且微生物来源的脂肪酶一般都是分泌性的胞外酶。;适合于工业化大生产和获得高纯度样品，因此微生物脂肪酶是工业用脂肪酶的重要来源，并且在理论研究方面也具有重要的意义。;微生物脂肪酶：细菌28个属 放线菌4个属 酵母菌10个属 其他真菌23个属 一共65个属的微生物生产脂肪酶;脂肪酶的生产方法 ;脂肪酶菌株的筛选 筛选路线： 采样→富集培养→初筛→复筛→检测酶活→鉴定菌种→保藏菌种 初筛方法：可淘汰85%-90%不符合要求的微生物利用平皿的生化反应进行分离;Rhodamine B 平板筛选法 筛选原理：只放在脂肪酶的催化作用下水解生成甘油和脂肪酸，脂肪酸能与Rhodamine B 的阳离子发生作用，生成黄色的荧光物质，所以用紫外灯的观察，产脂肪酶的菌株周围会出现荧光圈，依据荧光圈的大小进行菌株的筛选。; ;溴甲酚紫平板筛选法： 筛选原理：溴甲酚紫作为一种显色剂，其PH变色为5.2-6.8，在碱性条件下显紫色，在酸性条件下鲜黄色，只放在脂肪酶的催化作用下生成的脂肪酸会使培养基的PH降低，产脂肪酶菌株的周围会出现先黄色的透明圈，根据透明圈的有无和大小来筛选产脂肪酶的菌株，透明圈越大说明产脂肪酶活力越强。;琼脂块培养法： 将分离培养基用灭菌的打孔器制作成许多单个的直径约0.6cm的小琼脂块，排放在干净的培养皿内，将套选的菌株接种在这些小琼脂块上培养，让其充分生长。;然后依次再将长满菌的小琼脂块放到酶活测定板上，28℃培养1-3d，观察各菌落周围油脂水解圈的大小，水解菌越大，酶活越强，将水解圈大的菌株纯化后保存在斜面培养基上。;;测定脂肪酶酶活常用方法的比较;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;脂肪酶的特性，结构和催化作用原理;脂肪酶的最适温度和最适PH 脂肪酶的最适温度一般在30-60℃之间，最适PH一般为6-10，不同来源的脂肪酶的最适合的温度和最适合的PH差异也比较大。列入一株无花果假丝酵母的脂肪酶最适温度为42℃，最适PH为8.0，一株青霉突变株的最适温度为25℃，最适PH为10;脂肪酶的界面活化机理;在底物浓度处于溶解状态下，脂肪酶几乎没有活性，只有当底物浓度逐渐增加到超出其溶解度极限时，才表现出明显增加的活性，这种现象称为“界面活性”。;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;脂肪酶的类型和生理分布情况 大多数脂肪酶的行动特定位置上的脂至底物（小肠）甘油骨干。