发酵学 第7章 发酵工艺的控制3.pptVIP

第七节 CO2的影响及其控制 一、 CO2的影响 二、 CO2浓度的控制 CO2 代谢产物 合成产物的一种基质 1、对菌体： ◆CO2效应：在发酵生产中不同微生物或某一生长阶段对二氧化碳有着特殊的要求（促进或必须）； 如： CO2是大肠杆菌和链孢霉变株的生长因子，有时需达到30%才能生长。 ◆通常对菌体生长有抑制作用。 排气中高于4％时，糖代谢和呼吸速率下降。 2、对产物： ◆对发酵促进。 如牛链球菌发酵生产多糖，最重要的发酵条件是提供的空气中要含5%的CO2 ◆ CO2对某些发酵产生抑制作用。 如：氨基糖苷类抗生素紫苏霉素生产： 通以1％CO2，微生物对基质的代谢极慢，菌丝增长速度降低，紫苏霉素的产量比对照组降低33％。 通入2％CO2，紫苏霉素的产量比对比照组降低85％， CO2的含量超过3％，则不产生紫苏霉素。 ◆二氧化碳可通过改变pH而影响发酵生产。 3.影响机理： CO2作用膜脂质核心部位，改变膜流动性及表面电荷密度，影响膜运输效率，导致细胞生长受限制，形态改变；（HCO3- 影响细胞膜的膜蛋白） 与其他物质反应，与生长必需金属离子形成碳酸盐沉淀等，影响菌体生长和产物合成。 1.发酵液中CO2浓度的影响因素： ◆细胞呼吸强度； ◆发酵液流变学特性； ◆通气搅拌程度； ◆罐压大小； ◆设备规模 大发酵罐中CO2的分压是液体深度的函数，10 m深的发酵罐在0.101 MPa气压下操作，底部CO2分压是顶部CO2分压的2倍。如不提高搅拌转数，CO2就不易排出，在罐底形成碳酸，进而影响菌体的呼吸和产物的合成。 2.二氧化碳浓度的控制方法： CO2浓度控制应随它对发酵的影响而定。 CO2抑制产物合成：降低浓度； CO2促进产物合成：提高浓度。 ◆调节罐压、通气量和搅拌速度； ◆补料。（青霉素：补糖，增加CO2 产生，降低PH。） 第八节 补料的作用和控制 一、FBC的特点 二、FBC的作用 三、补料方式及控制 补料分批发酵(fed-batch culture，简称FBC)，又称半连续培养或半连续发酵，是指在分批发酵过程中，间歇或连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法，是分批发酵和连续发酵之间的一种过渡培养方式，是一种控制发酵的好方法，现已广泛用于发酵工业。 一、FBC的特点 同传统的分批发酵相比，FBC具有以下的优点： ① 可以解除底物抑制、产物反馈抑制和分解代谢物的阻遏； ② 可以避免在分批发酵中因一次投料过多造成菌体过量生长，发酵液过于粘稠、氧的传递能力下降等不良后果； ③可作为理论研究的手段，为自动控制和最优控制提供实验基础。 同连续发酵相比，FBC不需要严格的无菌条件，产生菌也不会产生老化和变异等问题，适用范围也比连续发酵广泛。 二、FBC的作用 ⒈ 可以控制抑制性底物的浓度 高浓度营养物抑制微生物生长： 基质过浓使渗透压过高，细胞因脱水而死亡； 有的基质是合成产物必需的前体物质，浓度过高，就会影响菌体代谢或产生毒性，使产物产量降低。 采用FBC方式，可以控制适当的基质浓度，解除抑制作用，得到高浓度的产物。 ⒉ 可以解除或减弱分解代谢物的阻遏 有些合成酶受到迅速利用的碳源或氮源的阻遏，如葡萄糖阻抑纤维素酶、赤霉素、青霉素等多种酶或产物的合成。 例：缓慢流加葡萄糖，纤维素酶的产量几乎增加200倍；将葡萄糖浓度控制在0.02％水平，赤霉素浓度可达905 mg／L；采用滴加葡萄糖的技术，可明显提高青霉素的发酵单位等。 ⒊ 可以使发酵过程最佳化 随着FBC补料方式的不断改进，为发酵过程的优化和反馈控制奠定了基础。 随着计算机、传感器等的发展和应用，已有可能用离线方式计算或用模拟复杂的数学模型在线方式实现最优化控制。 3.补料中应注意的问题 选择合适的补料的时机、方式和控制指标 料液的配比要恰当（如C/N等） 注意对培养基性质的改变（如pH值等） 加强无菌控制 经济、节约 第九节 泡沫的影响及其控制 一、泡沫的形成及其对发酵的影响 二、影响泡沫形成的因素 三、泡沫的控制 一、泡沫的形成及其对发酵的影响 1.形成条件： 气-液两相共存； 表面张力大的物质存在 起泡速度高于破泡速度 2.形成的泡沫有两种类型： 一种是发酵液液面上的泡沫，气相所占的比例特别大，与液体有较明显的界限，如发酵前期的泡沫； 另一种是发酵液中的泡沫，又称流态泡沫，分散在发酵液中，比较稳定，与液体之间无明显的界限 （1）通气搅拌的强烈程度 （2）培养基原材料的影响 培养基中某些成分(如蛋白质及其他胶体物质)的分子，在气泡表面排列形成坚