化学酶法合成D-丙氨酸过程动力学的分析研究.pdfVIP

摘要 D．|天J氰酸是一种重要的医药中间体，广泛用于医药和食品添加剂等领域。本 文通过对幽内外D一丙氨酸制备技术的比较及本实验室在海因酶法制备D一氨基酸 技术}：的优势，采用海因酶法制备D．丙氨酸的路线。 论文=酋先对5．甲基海因的制备技术进行了研究，采用Henze和Speer的方法 进行5甲基海因的制备，此方法反应条件简单，反应时间短，污染少，所得产 物纯度也比较商。通过对影响反应的因素如温度、pH等的研究，确定了此反应 的最伟条传，先于温度80。C下水浴反应2小时，配料比l：1．5，pH9．5，再用浓 ＼ 盐酸将反应液pH调至2左右，继续反应2小时，真空浓缩，可得粗品海因，纯 度口_『达85％以上，收率可达80％以上，采用乙醇和水的混合溶液进行重结晶，可 得纯度98％以上的精制产物。此方法条件简单，反应收率较高，产品纯度高，具 、 ／ 有很好的应用前景。，7 在论艾研究中发现采用【-丙氨酸所制备的海因为有光学活性的L型海因， 因此，海㈨的消旋成为转化过程中的一个重要步骤。通过对本海因酶转化体系的 研究．确定了其中海因酶为D．海因酶，N．氨甲酰氨基酸水解酶为D一型选择性酶。 ／- 俘￡何严格的光学选择性；测定了D．海因酶对DL．5一甲基海冈的酶解[4an，通过 ‘ ＼ 【v]／[s1的长系图可知本体系中D一海因酶的酶解过程符合经典米氏方程：测定了 N一氨甲酰氨基酸水解酶对中削产物N．氨甲酰．DL一丙氨酸的Km及最大反应速度， 、 说明了此酶反应存在着比较明显的底物抑制作用。}t7 ／ ， 随后对L．5一甲基海因的自发消旋动力学过程进行了研究。确定了L．5．甲基海 斟的自发消旋过程符合一级反应动力学过程，测定了L一5．甲基海因在不同温度、 pHF的F{发消旋速率常数，并由此汁算出L．5．甲基海因在不同温度、pH—F的自 发消旋半寝期，井与文献上苄基海因、对羟基苯海凼的自发消旋半衰期做一比 较，町看出L．5．甲基海因的自发消旋速率明显较低。 仪仪号虑自H 步消旋及一步酶解，假发消旋过程为自发过程，没有消旋酶的 参勺，符合一绒反应动力学，从而拟合得出SDl。对时阳J的关系图，在反应环境 pH保持D一海因酶的最适pH的情况F，此拟合结果和实际结果符合的比较好， IIJ知奉海队l酶转化体系中，并无消旋酶的存在。 ， 、／’才 山上二述研究结果，考虑一步化学消旋捌两步酶解的复杂反应过程，J采用阳阶 j ／ 龙格库塔法．数学工具进行拟合非线性微分疗程的数值解，兮别得到底物、中间 产：物、最终产物对时阳j的关系图．分别拟合了不同pH下三种物质对时间的关系， Ll『沦了pH对转化的影响。 (由理沦指导，确定了D-丙氨酸的转化工艺：采用先消旋后转化的方法，缩 短了转化时问。摸索了最佳消旋条件：pH．，温度 。综合考虑了温度、 HpC。温0：9Hp与度01温9化=．转的优较了定确，响影的化转及旋消对 5。厂、》一n 度45。C，pH9—9 关键卅：海因酶法．一菌双酶，5-甲基海因，D-海因酶， D-N一氨甲酰基氨基酸水解酶D．丙氨酸D一氨基酸 Abstract