梭毒隐翅虫脂溶性成分气相色谱—质谱联用研究.doc

梭毒隐翅虫脂溶性成分气相色谱—质谱联用研究摘要：采用氯仿为溶剂超声辅助提取梭毒隐翅虫（Paederus fuscipes Curtis）的脂溶性成分， 并采用气相色谱—质谱联用技术对其进行了分析鉴定。结果共检出92种脂溶性成分，并鉴定出其中的48种， 可鉴定成分相对百分含量之和达到83.41%，其中相对百分含量较高的有（Z）—13—二十二酰胺（12.79%）、二十四烷（9.13%）、二十八烷（8.76%）、油酸乙酯（8.06%）、（Z）—9—十八烯酰胺（5.57%）。 关键词：梭毒隐翅虫（Paederus fuscipes Curtis）；脂溶性成分；气相色谱—质谱联用 中图分类号：O657.63 文献标识码：A 文章编号：0439—8114（2012）19—4366—03 梭毒隐翅虫（Paederus fuscipes Curtis）隶属于毒隐翅虫属（Paederus），该属已知种类超过250种[1]， 产自世界各地，已报道的毒隐翅虫有21种[2]。毒隐翅虫体内含有强烈接触毒物，呈强酸性[3]，触及皮肤可导致皮炎，出现痒红肿痛、水疱，可阻止细胞有丝分裂，抑制鼠类的癌肿瘤，已成为一种试验性抗菌素[4]。隐翅虫含毒素虽危害人体皮肤，但在医学上又发现隐翅虫毒素可以毒攻毒，既能迅速破坏组织，又能迅速完整地使其复原，从而治疗人体皮肤多种疾病。在《中药大辞典》中药名为花蚁虫，能解毒、杀虫、止痒、治神经性皮炎、癣疮。 毒隐翅虫的毒液化学成分复杂，除以上3种毒素外，还含有醛类、醌类、萜类等物质[4，5]。为了更好地了解贵州毒隐翅虫中毒液所含的化学成分，采用气相色谱—质谱联用方法对贵州产的梭毒隐翅虫的脂溶性成分进行了分离、鉴定并测定其相对含量，为贵州毒隐翅虫的利用和预防提供科学依据。 1 材料与方法 1.1 材料 梭毒隐翅虫（Paederus fuscipes Curtis）于2009年8月购自贵州罗甸；氯仿为分析纯。 1.2 仪器 KQ—500DE数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Agilent 6890—5973气相色谱—质谱联用仪（美国Agilent公司）；AL204型电子天平（梅特勒—托利多公司）。 1.3 脂溶性成分提取 梭毒隐翅虫干燥后粉碎，过60目筛。取毒隐翅虫粉末约1 g置于250 mL具塞锥形瓶中，加入100 mL氯仿溶液，超声辅助提取30 min，提取结束后静置，用氯仿补足减失的重量，混匀。将氯仿提取物过滤，取滤液1 mL采用0.45 μm微孔滤膜过滤置于专用样品瓶中，待GC/MS测定。另取滤液10 mL置于干净的表面皿中，挥干氯仿至恒重，减除表面皿重量得氯仿提取物中脂溶性成分含量为0.6 mg/mL， 由此计算毒隐翅虫干燥虫体中脂溶性成分含量为60 mg/g。 1.4 GC—MS分析 色谱条件：HP—5MS（5%苯取代甲基硅酮）色谱柱（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）；程序升温：初始柱温为70 ℃，以8 ℃/min升至180 ℃，再以1 ℃/min升至200 ℃，以2 ℃/min升至250 ℃保持5 min；汽化室温度260 ℃；载气为高纯He，流速1 mL/min；进样量1 μL；分流比20∶1。 质谱条件：离子源温度230 ℃；四极杆温度150 ℃；电离方式为EI，电子能量70 eV；溶剂延迟4 min；质量扫描范围30～500 amu。 2 结果与分析 用峰面积归一化法计算各组分的相对质量分数，对初始阈值≥13.60，初始峰宽≥0.08的化合物峰进行积分并鉴定，用美国Wiley、NIST05两种数据库的质谱数据进行计算机检索比对，并进行人工图谱解析得出化合物结构。结果共有92个化合物得到积分，其中48个成分得到鉴定，其相对质量分数之和占总数的83.41%，挥发油的总离子流图见图1，鉴定结果见表1。未鉴定成分中未见含量较高成分。 从图1可以看出，梭毒隐翅虫脂溶性成分中含有大量的各式化合物，可检出的成分达92个，在动物体内存在如此种类众多的脂溶性成分比较少见。从表1中可以看出，梭毒隐翅虫脂溶性成分中有48种化合物得以鉴定，其结构大致可以分为4类：①脂肪烃类，包括烷、烯、炔，特别是直链烷烃较多，且成系列；②酰胺类，含有多种脂肪酰胺类化合物，说明氮元素含量高；③酯；④醛与酮。这4类占可鉴定成分中的绝大多数，脂肪烃类物质有13种，其中二十四烷含量高达9.13%；酰胺类物质有6种，包括含量最高的（Z）—13—二十二酰胺（12.79%）以及（Z）—9—十八烯酰胺（5.57%）；酯类物质8种；醛与酮10种。 酰胺类化合物是具有多方面生物活性的一类物质，大量文献表明脂肪酰胺具有中枢抑制作用，脂肪酰胺类物质作为内源性生物活性脂质参与生物体的多种