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丙氨酸氨基转移酶 （ALT）测定作业指导书 NXLJ-SOP-011.10 Edition 1.0 ALT 丙氨酸氨基转移酶 （ ）测定作业指导书 1 检验目的 丙氨酸氨基转移酶 （alanineaminotransferase,ALT）用于检测人血清中的 ALT含量。各种肝炎急性期，许多药物引起的肝病及各种肝细胞坏死均可见ALT 显著增高。因而，ALT检测是肝细胞损伤的灵敏指标。 2 检测原理 L-谷氨酸 +α-酮戊二酸 ALT L谷氨酸 + 丙酮酸 丙酮酸 +NADH + H+ LDH L-乳酸 + NAD+ + HO2 在340nm连续监测NADH吸光度的变化，下降的速率与样品中ALT 的活力成 正比。 3 性能参数 3.1 线性范围：10-1000U/l，如果样品中的ALT超过线性范围，应将样品稀 释后进行测定，结果乘以稀释倍数。 3.2 精密度：批内差≤10%，批间差≤10%。 3.3 灵敏度： 3.4 准确性：检测结果准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。 3.5 检验结果的可报告区间：1-5000U/l。 4 原始样本系统 4.1 静脉抽取病人空腹血； 4.2 采血后常温条件下立即送到生化室； 4.3 样品收到立即分离血清，不能及时测定的血清应于2-8℃保存； 4.4 溶血或脂血标本不能测定。 5 容器和添加物类型 置于洁净干燥试管或促凝剂的真空管内。 6 设备与试剂 6.1 ADVIA2400全自动生化分析仪。 6.2 北京九强生物技术有限公司ALT试剂。 SOP标准操作程序 第 1页 共5页 宁夏回族自治区人民医院临床医学检验诊断中心 丙氨酸氨基转移酶 （ALT）测定作业指导书 NXLJ-SOP-011.10 Edition 1.0 6.2.1 试剂成份： 试剂1：缓冲液 （PH=7.50） 100mmol/l L-丙氨酸 500mmol/l LDH ≥1200U/L 试剂2：α-酮戊二酸 15mmol/l NADH 0.18mmol/l 6.2.2 校准物：配套校准物。 贮存条件：原校准物在2-8℃可保存至有效期。 校准条件：A：质控失控。B：试剂换批号。 6.2.3 质控物：RANDOX质控物。 贮存条件：质控物存放于2-8℃可保存至有效期，溶解后25℃可保存12小 时，4℃可保存5天，分装于-20℃可稳定一个月。 准备：用玻璃吸管准确吸取5.0ml去离子水，溶解RONDOX质控血清，时间 30分钟。 6.2.4 ALT试剂应储存在2-8℃冰箱。 7 校准程序 7.1 校准类型：线性模式，两个校准点。 7.2 校准周期：在同一批号试剂的使用效期内，质控品的测定如在标定范围 内，标准曲线可持续使用。但在更换试剂批号或出现质控漂移时，仪器进行 全面保养后，以及仪器重要零件更换后，应进行校准。 7.3 校准步骤：装载试剂→输入校准项目→加载校准液→进行校准。 8 程序步骤 8.1 设置项目基本参数，详见附表； 8.2 试剂的检查：每天测定前先检查各种试剂的检测量、有效期、定标、质 控等情况，确认无误后方可进行测定； 8.3 样本的准备：将编号好的样本离心，取血清加入样品杯放到样品盘的规 定位置，再把样品杯放到仪器中相应位置； SOP标准操作程序 第2页 共5页 宁夏回族自治区人民医院临床医学检验诊断中心 丙氨酸氨基转移酶 （ALT）测定作业指导书 NXLJ-SOP-011.10 Edition 1.0 8.4 仪器操作：装载试剂→进行校