第二章荧光法检测水中矿物油的原理以及可行性分析.doc

第二章 荧光光谱分析法的基本原理 2.1 引言 根据物质分子吸收光谱和荧光光谱能级跃迁机理，具有吸收光子能力的物质在特定波长光（如紫外光）照射下可在瞬间发射出比激发光波长长的荧光利用物质的荧光光谱进行定性、定量分析的方法称为荧光分析法。 当某些物质受到紫外线照射时，会发射出各种颜色和不同强度的可见光，当紫外线停止照射时，所发射的光线会随即消失，人们将这种光线称为荧光。荧光由一种能发荧光的物质-萤石而得名。荧光的产生主要包括物质分子对光能的选择性吸收、激发和分子的去活化三个过程。 2.2.1.1光的选择性吸收 光在通过物质的过程中，由于某些频率的光被吸收而强度减弱，这一现象被称为物质对光的吸收。原子、分子或者离子都具有不连续的、数目有限的量子化能级结构，且只能吸收与两能级之差相同或为整数倍的能量。当所照射的光线和所被测物质的分子具有相同的频率时，入射光才能够该物质的分子所吸收。根据量子学理论，分子所吸收的光线可由此来表示，即 (2-1) 式中 E1——吸光物质的高能级（一般为激发态）； E0——吸光物质的低能级（一般为基态）； ——普朗克（Plank）常数； ——光的频率； ——光的波长； ——光在真空中的速度。 由于不同物质的特征能级不同，所以它们所吸收的光的波长和颜色也是有区别的，即它们所吸光能量也是不一样的，每种物质都有其特有的吸光光谱。 2.2.1.2分子的激发 物质在吸入入射光的过程中，光子的能量传递给物质分子，当物质吸收了不同频率的光能量后，分子中的电子就会由原来的基态跃迁到激发态的不同能级上，这一过程被称为激发。这一跃迁过程经历的时间约为10-15s。跃迁过程中所涉及的两个能级之间的能量差，就等于物质分子所吸收的光子的能量。其中，紫外和可见光的光子能量较高，足够引起分子中电子发生电子能级的跃迁，处于这种激发态的分子称为电子激发态分子。 通常有机分子中的价电子数为偶数，根据Pauli不相容原理，假设基态分子中自旋方向为正反两种，并且数目各占一半，则价电子的自旋量子数为零，即S=0，自旋多重态M=2S+1=1，这时称分子处于单重态，用S表示。另外还有个别物质的分子正向旋转和反向旋转的电子数目不等，并且正旋和反旋数目之差为2，则这时S=1，M=2S+1=3，称这类分子处于三重态，用T表示。基态分子和激发分子都有单重态和三重态之分。处于单重态的电子基态(S0)的分子被激发时，很容易跃迁到单重态的电子的激发态（S1、S2、S3……），但很难跃迁到三重态的电子激发态（T1、T2、T3……）。大多数物质的分子在室温下处于单重态的振动能级，荧光和磷光所涉及的分子都处于分子的单重态，具有最低的振动能级。 2.2.1.3 激发态分子的去活化过程 处于激发态的分子不稳定，它可能通过辐射跃迁和非辐射跃迁两种方式返回到基态。当然，激发态的分子也可能由分子间的相互间的作用过程而失活。在辐射跃迁的衰变过程中，会伴随有荧光和磷光的产生。 非辐射跃迁衰变过程主要包括振动弛豫（VR） 图2-2 分子的激发和去活化过程 A1，A2.吸收；F.荧光；P.磷光；ic.内转化；isc.系间窜越；VR.振动松弛 由于系间窜越是自旋禁阻的，所以其速率常数非常小。内转化和系间窜越与所涉及的两个电子态的最低振动能级间的能量间隔有关，能量间隔越大，速率越小。在以上几种衰变途径中，从S1—S0的衰变过程中，会伴随有荧光的产生，而T1—S0的跃迁过程中，可能有磷光的产生。 2.2.2 影响分子产生荧光的主要因素 2.2.2.1 荧光量子产率和荧光寿命 荧光寿命和荧光量子产率时荧光物质的重要发光参数。 (1)荧光量子产率 荧光量子产率定义为荧光物质吸收入射光后所发射的荧光光子数目与所吸收的入射光的光子数目之比。即 荧光量子产率=发射荧光的光子数目/吸收入射光的光子数目 由于激发分子的衰变过程包括辐射跃迁和非辐射跃迁，故荧光量子产率也可以由以下公式来表示： (2-2) 式中 ——荧光量子产率； ——发射荧光的速率常数； ——各种单分子非辐射去活化过程的速率常数。 可见，荧光量子产率取决与荧光发射过程中辐射跃迁和非辐射跃迁的竞争能力的强弱。若非辐射跃迁的速率远远小于辐射跃迁的速率，即,则的值将接近于1，荧光量子产率越大，所发射的荧光强度越强。荧光量子产率的大小取决荧光物质的结构和性质，及荧光物质所处的环境。 (1)荧光寿命 荧光寿命定义为当激发光切断后，荧光强度衰减至原来强度的所用的时间或者说激发态的分子数目衰减至原来数目的所经历的时间。荧光分子的最低单重激发态的平均寿命，可表示为