再谈同位素标记在高中生物学中的应用-Natpro.DOCVIP

再谈同位素标记在高中生物学中的应用 生物组 潘俊霞 2010年江苏省卷生物试题单科第28题考了一道关于有丝分裂的题。细胞周期包括分裂间期（分为G1期、S期和G2期）和分裂期（M期）。下图标注了甲动物（体细胞染色体数为12）肠上皮细胞的细胞周期各阶段的时长及DNA含量。请回答下列问题： （1）若用含放射性同位素的胸苷（DNA复制的原料之一）短期培养甲动物上皮细胞后，处于S期的细胞都会被标记。洗脱含放射性同位素的胸苷，用无放射性的新鲜培养液培养，定期检测。预计最快约 h后会检测到被标记的细胞。（G2期时长：2.2h） （2）从被标记M期细胞开始出现到其所占M期细胞总数的比例达到最大值时，所经历的时间为 期的时间。（M期：1.8h） 上述题中用的是同位素标记方法来检测时间的长短，下面再谈一下同位素（或同位素示踪技术）在高中生物学的应用。 同位素示踪技术是研究生物学实验的一项重要技术。同位素示踪技术实验的创建者是Hevesy.Hevesy于1923年首先用天然放射性212Pb研究铅盐在豆科植物体的分布和转移。同位素示踪所利用的放射性核素（或稳定性核素）及它们的化合物，与自然界存在的普遍元素及其化合物的化学性质和生物学性质是相同的，只是具有不同的核物理性质。利用放射性同位素不断放出特征射性的核物理性质，就可以用核探测器追踪它在体内或体外的位置、数量及其转变。稳定性同位素虽不释放射性，但可以利用它与普通相应同位素的质量之间，用一定的仪器也可以测定。在高中生物所涉及的实验中上述两种同位素都有用到。 1、用放射性同位素3H标识亮氨酸研究蛋白质的合成过程。 新课标（人教版）必修1在资料分析中介绍了科学家研究蛋白质的合成过程。 帕拉德及其同事把用放射性同位素3H标记的亮氨酸注入到豚鼠的胰腺腺泡细胞中，发现3min后被3H标记的亮氨酸出现在内质网中；17min后出现在高尔基体中；117min后，出现在靠近细胞膜内侧的运输蛋白质的囊泡中，以及释放剂细胞外的分泌物中，由此可以看出，分泌蛋白最先由内质网上的核糖体形成，然后转移到内质网加工，再通过出芽方式形成囊泡，到高尔基体进一步加工，最后通过细胞膜的胞吐作用运输到细胞外。从而也证明了生物膜在结构和功能的联系性。 2. 利用放射性同位素标记14C研究C元素（或CO2）在光合作用中转移途径以及光合作用的产物。 2.1 20世纪50年代，M.Calvin等人利用放射性核素14C标记14CO2失踪实验中发现，在加入14CO2几秒后，就有14C-3-磷酸甘油酸的积累，随后又出现在六碳糖缩合成的淀粉中。在放射性核素实验中证明，CO2首先在核酮糖1，5-二磷酸羧化酶催化下，CO2同核酮糖1,5-二磷酸（RuBp一种C5化合物）结合生成2分子的3-磷酸甘油酸（14C3化合物）。随后，3-磷酸甘油酸消耗光反应产生的ATP，生成1-3-二磷酸甘油酸，1-3二磷酸甘油酸接受光反应产生了六碳糖和更为复杂的化合物。结果显示，六碳化合物的六个碳原子都带有14C标记，由于上述过程中，CO2与C5结合首先生成了一种C3化合物，因此叫C3循环也叫卡尔文循环。 2.2 C4植物的发现 20世纪60年代，澳大利亚M.D.Hatch和C.R.Slack发现有些热带植物如甘蔗、玉米除了和其他植物一样具有卡尔文循环外，还有一条固定CO2的途径，即C4途径，它和卡尔文循环联系在一起。C4途径是14CO2首先与植物体内一种C3化合物磷酸希醇式丙酮酸在磷酸希醇式丙酮酸羧化酶催化下生成一种合四个碳原子的化合物草酰乙酸。所以这个反应途径称四碳双羧酸途径，亦称C4光合碳同化，也称为Hatch-Slack途径。 2.3 探究光合作用的产物 2.3.1 长期以来，糖类曾被认为是光合作用的唯一产物，而其它物质是再度合成的(如蛋白质、脂肪和有机酸)，是植物利用糖再度合成的。的确，这些物质一部分是再度合成的，但有些是光合作用的直接产物。科学家利用14CO2供给小球藻，在未产生糖之间，就发现有放射性的氨基酸（如丙氨酸、甘氨酸）和有机酸（如丙酮酸、苹果酸）出现。以14C-醋酸供给离体的叶绿体，光照后，14C进入叶绿体中某些脂肪酸（如棕榈酸、油酸和亚油酸）中。由此可见，蛋白质、脂肪和有机酸也都是光合作用的直接产物。 2.3.2 光合作用的产物O2是来自H2O还是CO2？ 1939年，美国科学家鲁宾和卡门利用稳定性同位素，标记进行了探究。他们用同位素18O分别标记H218O和C18O2，然后进行了两组实验：第一组向植物提供提供H2O和C18O2，第二组向同种植物提供，H2O和CO2。在其他条件都相同的情况下，他们分析了两组实验释放的O2，结果标明，第一组释放的O2全部是O2，第二组释放的O2全部是18O2，这一实验有力证明光合作用释放的O2来自水。但时间长了