岛津LC-10AD型高效液相色谱仪操作规程.docVIP

岛津LC-10AD型高效液相色谱仪操作规程 1．目的 规范岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。 2．范围 适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。 3．职责 质检员对本规程的实施负责。 4．规程 4.1 系统组成 本系统由1个LC-10ADvp溶剂输送泵、FCV-10AL低压梯度混合器、在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。 4.2 准备 4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。 4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。 4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。 4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 4.3 开机 接通电源，依次打开FCV-10AL低压梯度混合器、脱气机、LC-10ADVP输液泵、AT-130柱温箱，SPD-10Avp紫外检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。 4.4 参数设定 4.4.1 波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需波长值，按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。 4.4.2 流速设定：在输送泵显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需的流速（柱在线时流速一般不超过1ml/min），按[Enter]键确认。按[CE]键退出。 4.4.3 流动相比例设定：在输送泵显示初始屏幕时，按[conc]键，用数字键输入流动相B的浓度百分数，用数字键输入流动相C的浓度百分数，用数字键输入流动相D的浓度百分数，按[Enter]键确认。按[CE]键退出。 4.5 更换流动相并排气泡 4.5.1将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中； 4.5.2 逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀； 4.5.3 按输送泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以5.0ml/min的流速冲洗，3min后停止； 4.5.4 将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。 4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。 4.5.6 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值 4.6 平衡系统 4.6.1 按《N2000色谱数据工作站操作规程》打开“在线色谱工作站”软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，按下“数据收集”页的[查看基线] 按钮。 4.6.2洗脱方式 4.6.2.1 按泵的[pump]键， pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。 4.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。 4.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按4.5.6操作。 4.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移0.01mV/min，噪声为0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。 4.7 进样 4.7.1 进样前按检测器[zero]键调零，按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点，再按一下 [查看基线] 按钮使其弹起。 4.7.2 用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。 简单故障排除 障常发生于泵和紫外检测器。 一、泵的故障及排除方法 1、泵压力变化较大或没有流动相流出，又无压力指示 （1）原因是泵内有大量气体。可打开排放阀，使泵在较大流量下运转，将气泡排尽；也可以用一个50ml 针筒在泵出口处帮助抽出气体。 （2）原因是高压密封环变形，产生漏液。必须更换密封环；平时注意不要超出规定的最高压力。 2、泵流量或压力不稳 （1）原因是砂滤棒内有气泡或被盐的微晶粒或溢生的微生物部分堵塞。可卸下砂滤棒浸入10%硝酸内超 声除去微生物或盐溶解，或浸入流动相内超声除气泡。再用蒸馏水立即清洗。 （2）原因是系统内有气泡。可加大流量排出气泡。 （3）原因是单向阀有异物。可卸下单向阀，放入烧杯中，加10%稀硝酸，用超声波清洗20分钟后，再用 干净蒸馏水清洗。 3、泵压力过高 原因是管路被堵塞，需要卸下管道清除和清洗；压力过低的原因是管路滴漏，可扳紧各接口和更换损坏 的管道。 4、键开关按下，泵不运行，只有嗡嗡电流声 此故障原因是电机缺相，电机线圈被烧坏一组或活塞被生锈卡住，应视情况给予排除。 二、SPD-10A紫外检测器的故障及排除方法 1、系统内有气泡 （1）如果气泡连续不断地通过流动池，将使噪声增大。