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CpG ODN增强乙肝疫苗免疫反应探究 　 作者：戴帆，董斌，郭晓磊，石碧珠，方丽娟，莫家琳，田素娟，孟民杰 【摘要】 　　目的 研究人工合成的CpG ODN对乙肝表面抗原的免疫增强效应，评价CpG ODN的佐剂效应。方法 将不同剂量特定的CpG ODN与乙肝表面抗原联合免疫小鼠，用ELISA检测小鼠乙肝表面抗体的滴度。结果 CpG ODN联合乙肝表面抗原免疫小鼠，在短期检测中，高剂量组能较快的达到检测阈，各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(Plt;0.05)，在长期检测中，各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(Plt;0.05)，检测值随CpG剂量的增高而增大。结论 CpG ODN增强乙肝表面抗原的免疫反应短期和长期都具有剂量效应。 【关键词】 CpG ODN 乙肝表面抗原 免疫佐剂 体液免疫 　Abstract:Objective To investigate the effects of immunological enhancement of HBsAg with synthetic CpG oligodeoxynucleotides,evaluate the adjuvant effect of CpG ODN. Methods Mice were vaccinated with CpG oligodeoxynucledtides and HBsAg at different doses,and then titers of HBsAb in the blood serums of mice were detected with ELISA. Results CpG ODN and HBsAg immunize the BALb/c mice,the highdose group could be detected quickly in shot term,the levels of antibodies in groups which use different doses of CpG ODN and HBsAg were different in statics(Plt;0.05),in long term the levels of antibodies in groups which use different doses of CpG ODN and HBsAg were different in statics(Plt;0.05),the levels of antibodies were corresponded with the levels of CpG ODN (Plt;0.05).Conclusion The immunological effect of HBsAg was enhanced with CpG ODN as adjuvant in short and long terms. 　　Key words:CpG ODN; HBsAg; immunoadjuvant; humoral immunity 　　CpG基序是一种具有非特异性免疫刺激能力的DNA序列，为非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸重复序列。CpG ODN (unmethylated CpG motifbased oligodeoxynucleotide)是人工合成的含未甲基化CpG基序的寡核苷酸序列。CpG ODN可刺激人类和多种动物产生自然免疫和获得性免疫，主要通过TLR9信号系统活化免疫系统，最终促使多种免疫细胞的成熟分化和增殖，包括B淋巴细胞、T淋巴细胞、NK细胞、单核细胞、巨噬细胞和DC细胞。CpG ODN能快速活化T、B细胞，诱导Th1型免疫反应并能促进抗原递呈细胞的增生和成熟[1]。现阶段我国对乙型肝炎的预防主要是通过注射乙型肝炎疫苗，但接种免疫过程中和接种免疫后会出现免疫较弱和不免疫现象[2,3]。所以，选择一种安全有效的免疫佐剂是增强免疫效果的有效途径。本文通过测定不同时间段的小鼠注射CpG ODN和乙肝表面抗原后的抗体滴度，评价CpG ODN作为免疫佐剂增强乙肝疫苗的免疫效果。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 动物 BAL b/c小鼠，雄性，6周龄，体质量18～22 g，SPF级，购自中山大学实验动物中心，许可证号：SCXK(粤)20040011。 　　1.1.2 试剂 血源性乙肝表面抗原购自上海前尘生物，CpG ODN 由本实验室保存。 　　1.2 动物分组及免疫方案 　　1.2.1 动物分组 50只BAL b/c小鼠根据随机分配表，随机平均分成5组：第1组为HBsAg和高剂量CpGODN联合免疫组，第2组为HBsAg和中剂量CpGODN联合免疫组，第3组HBsAg和