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HPLC在测定血浆同型半胱氨酸含量中应用 　 作者：吴健翎 沈建昕 白雪梅 【摘要】 目的：探讨高效液相色谱法(HPLC)在测定血浆同型半胱氨酸含量中的 应用 。 方法 ：血浆同型半胱氨酸用邻苯二甲醛(OPA)衍生,经Hypersil AAODS色谱柱（2.1mm×200mm，5μm），用0.02 mol·L-1NaAc∶乙腈∶四氢呋喃=56∶43.8∶0.2的流动相洗脱,柱温40℃,检测波长330nm,流速1.3mL·min-1。结果：线性范围为0.48～31.25μg·mL-1,回归方程为A=27.167C+38.765，r=0.9962;平均回收率为98.61%,RSD=1.84(n=6)，日内及日间相对标准偏差均小于5%。结论：该法准确、简便、快捷，适用于大多数实验室。 毕业论文 【关键词】 同型半胱氨酸; 高效液相色谱法 论文代写 【ABSTRACT】 Objective: To set up the method for determining the content of HomocystEinEIn Human Plasma with HPLC. Methods: Column was Hypersil AAODS(2.1mm×200mm,5μm),using 0.02mol·L1Sodium acetate AcetonitrileTetrahydrofuran（56∶43.8∶0.2） Balanced Solution as mobile phase and detective wavelength at 330nm，the fiowing speed was 1.3ml·min-1，and Column temperature was 40℃.Results: The calibration curve was linear in the range of 0.48 ～ 31.25μg·mL-1 and ,The linear correlation equation was A=27.167+38.765(r=0.9962)The average recovery rate was 98.61%,and RSD was Between 1.84%（n=6）. The standard relative difference within a day and between two days was lower than 5%. Conclusion: The method is simple、accurate,and fast, which is suitable for the most lab test. 【KEY WORDS】 Homocysteinein；HPLC 同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)是一种含硫氨基酸,是蛋氨酸循环中S腺苷基高半胱氨酸水解酶水解反应的产物。 研究 表明, 血中 Hcy 升高可致流产、新生儿缺陷、中风、老年性痴呆及其它老年性疾病如骨质疏松等，维生素B12及叶酸缺乏、心脑血管疾病等都可反映出血浆Hcy浓度异常变化[1]。血浆中Hcy测定已成为国外诊断维生素B12及叶酸缺乏、早期心脑血管疾病监控疗效的常规方法。 毕业论文 同型半胱氨酸的测定常用放射免疫法[2]、荧光偏振免疫 分析 法[3]及HPLC法等[4～6]。本研究在 参考 有关 文献 的基础上，对色谱条件进行了适当的改进，使测定更加简便、快速,应用于实际样品测定,效果良好。 毕业论文 1 仪器与试剂 1.1 仪器 HP1100高效液相色谱仪（包括在线脱气机、四元泵、柱温箱、荧光检测器、化学工作站），分析天平（A/D，1/10万，日本）。 1.2 试剂 衍生剂:50mg邻苯二甲醛(OPA)溶于4.5mL甲醇中,再加入0.25mol·L-1硼酸缓冲溶液(pH=8.4)0.5mL,巯基乙醇50μL,避光保存。1 g·L-1Hcy标准储备液:1mg Hcy溶于1mL 0.045mol·L-1HCl溶液中。Hcy标准品、邻苯二甲醛(Sigma公司)，甲醇、乙腈(色谱纯，天津科密欧化学试剂开发中心)，巯基乙醇、冰乙酸、乙酸钠、四氢呋喃均为分析纯试剂。三蒸水为本实验室自制。 2 实验方法 论文代写 2.1 色谱条件 论文代写 色谱柱为Hypersil AAODS（2.1mm×200mm，5μm），流动相：0.02mol·L-1NaAc(pH=7.20)∶乙腈∶四氢呋喃=56∶43.8∶0.2,柱温：40℃，流速为1.3mL/min,检测波长330nm,进样量：20μL。 毕业论文