HPLC法同时测定壮骨关节丸中3种有效成分含量.docVIP

HPLC法同时测定壮骨关节丸中3种有效成分含量 　 作者：杨静,谭沛,潘桂湘,代志,郭锦明 【摘要】 目的 建立同时测定壮骨关节丸中淫羊藿苷、补骨脂素和异补骨脂素含量的HPLC方法。方法 采用Zorbax SBC18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm)色谱柱；流动相：乙腈0.05%甲酸水溶液（梯度洗脱）；检测波长：0→8 min为270 nm，8→15 min为246 nm；流速：1.0 mL/min；柱温为35 ℃。结果 淫羊藿苷、补骨脂素、异补骨脂素分别在0.0223～0.713 μg（r=0.9997）、0.0272～0.869 μg （r=0.9998）、0.0213～0.681 μg（r=0.9998）范围内与峰面积呈良好的线性关系；平均回收率分别为101.1% (RSD=3.27%)、97.66%(RSD=2.46%)、99.65%(RSD=2.13%)。结论 该方法简便可行、重现性好、可作为壮骨关节丸的质量控制方法。 【关键词】 壮骨关节丸；淫羊藿苷；补骨脂素；异补骨脂素;梯度洗脱 　　Abstract:Objective To establish an HPLC-VWD method for simultaneous quantification of icariin, psoralen and isopsoralen in Zhuangguguanjie pills by using switching wavelength. Methods The separation was performed on a Zorbax SB-C18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm) column using the gradient elution which consisted of acetonitrile and 0.05% formic acid aqueous solution at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was at 270 nm in the first 8 min, while changed to 246 nm at 8-15 min. Column temperature was fixed at 35 ℃. Results For icariin , psoralen and isopsoralen, the linear ranges were 0.0223-0.713 μg(r=0.9997), 0.0272-0.869 μg (r=0.9998) and 0.0213-0.681 μg (r=0.9998), respectively, and their average recoveries were 101.1%(RSD=3.27%), 97.66%(RSD=2.46%) and 99.65%(RSD=2.13%), respectively. Conclusion The method could be used for the quality control of Zhuangguguanjie pills, which was available with a good reproducibility. 　　Key words:Zhuangguguanjie pills；switching wavelength；icariin；psoralen； isopsoralen 　　壮骨关节丸是由淫羊藿、补骨脂、狗脊、独活等十二味中药组成的复方制剂，具有补益肝肾、养血活血、舒筋活络、理气止痛之功效，用于肝肾不足、血瘀气滞、经络痹阻所致的骨性关节炎、腰肌劳损，症见关节肿胀、疼痛、麻木、活动受限等疾病［1］。淫羊藿、补骨脂均具有补肝肾、强筋骨、祛风湿的功效，是壮骨关节丸发挥药效的重要物质基础。淫羊藿苷为淫羊藿的主要有效成分，能够显著促进人成骨细胞的增殖和分化,且使BMP2mRNA的表达升高［2］；补骨脂素和异补骨脂素为补骨脂的主要有效成分［3，4］，能提高大鼠成骨细胞内碱性磷酸酶的活性，促进成骨细胞的增殖与分化［5］。已有文献报道对壮骨关节丸中的淫羊藿苷［6］、补骨脂素和异补骨脂素［7］分别进行了质量控制，但仅控制一种成分不能较全面地反映产品的质量。为了更好地控制该药品的内在质量, 保证临床用药的安全、有效，本研究选择淫羊藿苷、补骨脂素、异补骨脂素作为壮骨关节丸的质量控制指标，采用紫外波长切换的方法同时对3个成分进行了测定。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 Waters 2695高效液相色谱仪（四单元数码梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、VWD检测器）；METTLER