HPLC法测定清瘟解毒片中芍药苷含量.docVIP

HPLC法测定清瘟解毒片中芍药苷含量 　【摘要】 目的 测定清瘟解毒片中芍药苷的含量。方法 采用反相高效液相色谱法，DiamonsilC18柱，甲醇0.05 mol/L KH2PO4(体积比30∶70)为流动相，流速为1.0 mL·min-1，检测波长230 nm，柱温为室温。结果 芍药苷质量浓度在4.95～59.4 μg/mL间具有良好的线性关系(r=0.999 7)，芍药苷平均回收率为104.1%，方法精密度(RSD)为0.90%(n=6)。结论 该法可用于清瘟解毒片中芍药苷的含量测定。 【关键词】 清瘟解毒片;芍药苷;高效液相色谱法;含量测定 　　Abstract:Objective To determine the content of paeoniflorin in Qingwen Jiedu tablets.Methods RPHPLC method for the determination of paeoniflorin in Qingwen Jiedu tablets was established. The chromatographic column was DiamonsilC18. The mobile phase was methanol0.05 mol/L KH2PO4(30∶70). The flow rate was 1.0 mL·min-1,and the detection wavelength was 230 nm. The column temperature was 25℃.Results The linear range of Paeoniflorin was 4.95～59.4 μg/mL(r=0.999 7). The average recovery for Paeoniflorin was 104.1%,precision of the method was 0.90% (RSD,n=6).Conclusion The method can be used in assay of paeoniflorin of the preparation. 　　Key words:Qingwen Jiedu tablets;paeoniflorin;RPHPLC;assay 　 清瘟解毒片是由天花粉、葛根、白芷、玄参、赤芍等16味中药制成的中药成方制剂，具清瘟解毒之功效。临床用于治疗感冒、发热、怕冷、无汗头痛、口渴咽干、四肢酸痛、痄腮肿痛。该产品现行标准[1]采用HPLC法测定黄芩苷含量，有文献报道用高效液相色谱法测定该制剂中葛根素的含量[2]，但芍药苷含量测定未见文献报道。为进一步评价该制剂的质量，本文建立了清瘟解毒片中芍药苷含量测定的反相高效液相色谱法，该法具有分离效果好、灵敏、准确等优点，可用于该产品的质量控制。 　　1 仪器与试药 　　Agilent 1100高效液相色谱仪(安捷伦公司)，Agilent 1100系列双元泵，Agilent 1100可变波长检测器，Agilent 1100/化学工作站。DL360超声波清洗器(宁波石浦海天电子仪器厂)，工作频率(4.5±0.05)kHz，输出功率240 W。 　　芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110736200526)，清瘟解毒片(中山市中智制药有限公司，批号20060922规格：0.6 g/片)，甲醇为色谱纯，磷酸二氢钾为分析纯，水为双蒸水。 　　2 实验部分 　　2.1 样品液制备 　　2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品19.8 mg，置200 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液 (芍药苷质量浓度为99 μg·mL-1)。 　　2.1.2 供试品溶液的制备 取清瘟解毒片样品，研细，取约0.25 g，精密称定，精密加水25 mL，称定重量，超声处理30 min，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，续滤液0.45 μm滤膜过滤，作为供试品溶液。 　　2.1.3 阴性对照液的制备 取处方组成中除赤芍外的其余成分制成不含赤芍的阴性对照品，按“2.1.2”项下的制备方法处理得阴性对照液。 　　　2.2 色谱条件及系统适用性试验 　　色谱柱为 DiamonsilC18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm，迪马公司)，甲醇KH2PO4(体积比30∶70)，流速为1.0 mL·min-1，检测波长230 nm，柱温为室温。分别取对照品溶液(芍药苷质量浓度为29.7 μg·mL-1)、供试品溶液和阴性对照溶液10 μL注入色谱仪，理论板数以芍药苷峰计算应不低于4 500;芍药苷的拖尾因子为0.94，保留时间约为21.8 min，芍药