RP-HPLC测定肿瘤Ⅰ号胶囊中芦荟大黄素、大黄素及大黄酚含量.docVIP

RP-HPLC测定肿瘤Ⅰ号胶囊中芦荟大黄素、大黄素及大黄酚含量 　【摘要】 目的 建立肿瘤Ⅰ号胶囊中芦荟大黄素、大黄素与大黄酚的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为 Kromasil ODS-1（4.6 mm×200 mm, 5μm），以甲醇-0.1%磷酸（75 : 25）为流动相，流速为1.0ml/min，柱温35℃，检测波长为254nm。结果 芦荟大黄素在1.38～22.1μg/ml浓度范围内，大黄素在1.31～21.0μg/ml浓度范围内，大黄酚在 2.20～35.2μg/ml的范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数均为0.9999。方法平均回收率分别为98.1%（RSD=1.2%），98.6%（RSD=0.99%）和97.4%（RSD=1.4 %）。结论 方法简便，准确，重现性好，可作为肿瘤Ⅰ号胶囊质量控制方法之一。 【关键词】 肿瘤Ⅰ号胶囊；芦荟大黄素；大黄素；大黄酚；hplc 　　Simultaneous determination of Aloe-emodin,Emodin and Chrysophanol in ZhongliuⅠcapsule by HPLC 　　　【Abstract】 Objective To develop a HPLC method for simultaneous determination of Aloe-emodin、Emodin and Chrysophanol in ZhongliuⅠcapsule.Methods The analysis was used with a Kromasil ODS-1(4.6mm×200mm,5μm) column and a mobile phase of methanol -0.1% phosphoric acid solution（75：25）.The flow rate was 1.0ml/min and column temperature was 35 ℃. The detection wavelength was set at 254nm.Results The calibration curve was linear within the range of 1.38～22.1μg/ml for Aloe-emodin,1.31～21.0μg/ml for emodin and 2.20～35.2μg/ml (r=0.9999) for Chrysophanol, the average recoveries were 98.1%（RSD=1.2%）for Aloe-emodin, 98.6%（RSD=0.99%）for Emodin and 97.4%（RSD=1.4%） for Chrysophanol.Conclusion This method was convenient, accurate and reproducible for determination of Aloe-emodin, Emodin and Chrysophanol in ZhongliuⅠcapsule. 　　【Key words】 ZhongliuⅠcapsule; aloe-emodin; emodin; chrysophenol;HPLC 肿瘤Ⅰ号胶囊由莪术、丹参、大黄、淫羊藿等十余味药材提取加工制成，临床上治疗乳腺各类癌瘤、乳腺增生、乳腺炎均获得满意效果。有研究表明,大黄抗癌作用的主要成分为游离蒽醌衍生物和糖类。蒽醌类衍生物可通过抑制肿瘤细胞的呼吸和物质代谢，抑制DNA、RNA的生物合成达到抗癌作用［1］。本研究以大黄中芦荟大黄素、大黄素和大黄酚为检测指标成分，建立了肿瘤Ⅰ号胶囊中芦荟大黄素、大黄素和大黄酚的同时含量测定方法，结果表明该方法简便快速，分离度好，结果准确可靠。 　　1 仪器与试药 　　日本岛津LC-10AT型高效液相色谱仪，SPD-10A型紫外检测器；KQ-50B型超声仪。芦荟大黄素对照品、大黄素对照品和大黄酚对照品购于中国药品生物制品检定所，甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为重蒸水。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 色谱柱：Kromasil ODS-1（4.6mm×200mm，5μm），流动相甲醇︰0.1%磷酸（75∶25；v/v），柱温35℃，流速1.0ml/min，检测波长254nm，进样量20μl。在上述色谱条件下进样分析，理论塔板数按芦荟大黄素峰计算不低于2500，按大黄素峰计算不低于3000，按大黄酚计算不低于4000。芦荟大黄素、大黄素和大黄酚峰与相邻色谱峰的分离度均＞1.5。阴性对照对样品测定无干扰，色谱图见图1。 　　图1 HPLC色谱图　略 　　2.2 线性关系试验 分别取芦荟