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RPHPLC法测定舒肝保健茶中齐墩果酸含量 　 作者：王强，王跃飞，潘桂湘，张恒昆，戚爱棣 【摘要】 目的 建立舒肝保健茶中齐墩果酸的含量测定 方法 。方法 采用RPHPLC法，以Waters symmetry shield C18柱（3.9 mm×150 mm，5 μm）为色谱柱，乙腈水（体积比71∶29）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为220 nm，柱温25 ℃。结果 在0.0790～1.264 μg范围内，齐墩果酸的进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系，r=0.9999，平均回收率为96.5%，RSD为1.0%（n=6）。结论 本法灵敏、简便、重现性好,结果准确、可靠，可用于舒肝保健茶的质量控制。 【关键词】 反相高效液相色谱法；舒肝保健茶；齐墩果酸 论文代写 　　舒肝保健茶是由天津中医药大学中医药 研究 院制剂中心新研发的一种复方保健品，主要由藏茵陈、栀子、淡竹叶、甘草等成分组成，具有清热解毒、舒肝利胆的作用，可用于预防肝炎，主要用于病毒性肝炎、脂肪肝、消化不良的防御和 治疗 。藏茵陈是此方中的君药，其主要有效成分是齐墩果酸。 文献 报道齐墩果酸已成为有效的抗肝炎的单体成分，具有保肝、解肝毒的作用［1］。本文建立了舒肝保健茶中主要药效活性成分齐墩果酸的HPLC含量测定方法，结果令人满意。 毕业论文 　　1 仪器与试药 　　Waters2695液相色谱系统：四单元数码梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、Waters2487 DAD检测器、Empower工作站；METTLER TOLEDO AX205（瑞士）十万分之一天平；BP121S万分之一天平（瑞士沙脱利斯公司）。 　　舒肝保健茶（批号：061211，061212，061213）由天津中医药大学中医药研究院制剂中心提供；齐墩果酸对照品（批号：110709-200304）购于 中国 药品生物制品检定所；乙腈为色谱纯，水为高纯水。其它试剂均为 分析 纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，采用Waters symmetry shield C18柱（3.9 mm×150 mm，5 μm），流动相为乙腈水（体积比71∶29），检测波长为220 nm，流速为1.0 mL/min，采用25 ℃柱温。 理论 塔板数按齐墩果酸色谱峰 计算 不低于4 000。 论文代写 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取齐墩果酸对照品适量，加80%（质量分数）乙腈制成0.1 mg/mL的溶液，即得。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取舒肝保健茶，研细，取约2 g，精密称定，加入水20 mL溶解，再用乙醚萃取3次，每次20 mL，分取乙醚层，合并，蒸干，用80%（质量分数）乙腈溶解，转移至5 mL容量瓶中定容至刻度,滤过，作为供试液。 　　2.4 阴性对照溶液的制备 　　取处方量，以相同工艺制备缺藏茵陈阴性制剂，依“2.3”项下方法操作即得。 　　2.5 专属性试验 　　分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果为：齐墩果酸对照品和供试品色谱图中齐墩果酸峰与其它组分峰基线分离，分离度大于1.5，保留时间为17.490 min；阴性对照色谱图中与齐墩果酸对照品以及供试品色谱图中相对应的保留时间处无色谱峰出现，表明其它组分对齐墩果酸的测定无干扰,见图1。 　 　　2.6 线性关系考察 　　精密称取50 ℃减压干燥至恒重的齐墩果酸对照品6.32 mg，置50 mL容量瓶中，加80%（质量分数）乙腈溶解并定容至刻度，摇匀（质量浓度为126.4 μg/mL），分别用80%（质量分数）乙腈配成浓度为126.4、63.2、31.6、15.8、7.90 μg/mL的对照品溶液，各取10 μL进样，按“2.1”项下色谱条件测定，以峰面积（A）为纵坐标，对照品浓度（ρ）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：A=1754.3(ρ)+1355；r=0.9999，齐墩果酸在0.0790～1.264 μg/mL范围内呈良好的线性关系。 毕业论文 　　2.7 精密度试验 　　精密吸取同一份供试品溶液，连续进样6次，测定齐墩果酸峰面积值，RSD为1.7%（n=6），表明精密度良好。 　　图1 HPLC色谱图（略） 　　A.对照品; B.样品; C.阴性对照（缺藏茵陈） 　　Fig.1 HPLC Chromatograms（A control standard; B Sample; C Negative sample） 　　2.8 稳定性试验 　　按“