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一种高效分离大黄酚及大黄素甲醚简便方法 　 ; ; 作者：王定勇，陈铭祥，冯玉静 【摘要】; 目的 研究大黄酚和大黄素甲醚混合物的高效分离方法。方法 采用硅胶柱色谱进行分离，薄层色谱跟踪检测，HPLC检测产品纯度。结果 在以工业级柱层析硅胶（100～200目）为填充剂的色谱柱上，以石油醚乙酸乙酯甲酸(体积比100∶1∶0.5)为洗脱剂，可以将大黄酚和大黄素甲醚完全分离。结论 硅胶柱色谱可以实现大黄酚和大黄素甲醚的高效分离；产品经HPLC检测，纯度达99%以上。 【关键词】; 柱色谱法；大黄酚；大黄素甲醚 　　Abstract:Objective To study the efficient and simple method of separation of chrysophanol and physcion.Methods Using silica gel column chromatography for separation,TLC for tracking and detection,HPLC for purity detection of the products.Results Chrysophanol and physcion could be completely separated by industrial silica gel column chromatography ［100～200 mesh, petroleum etherethyl acetateformic acid (100∶1∶0.5) as elute］. Conclusion Chrysophanol and physcion could be effectively separated by silica gel column chromatography.Their purities were ≥99% by HPLC method. 　　Key words:column chromatography；chrysophanol；physcion 　　大黄(Rheum officinale Baill.) 为常用中药,具有泻下、抗菌、抗肿瘤、抗高脂血症、降低血压、健胃、利胆、保肝、强心、消炎、延缓衰老、调节免疫等作用［1］。大黄的主要有效成分是其中的5种游离蒽醌类化合物（见图1），例如，大黄酸具有抗肿瘤、抗炎、抗菌及调节肾功能等作用［2］；大黄素具有抑菌、抗炎、保护肝肾、抑制血小板聚集、改善微循环、抗癌等作用［3］；芦荟大黄素具有清除氧自由基、诱导肿瘤细胞凋亡等作用［4］；大黄素甲醚可通过血脑屏障，具有很强的抗炎作用［5］；大黄酚具有抗衰老作用、止血作用［6］。大黄酸、大黄素和芦荟大黄素可以通过简单的pH 梯度萃取法和重结晶得到单体，而大黄酚和大黄素甲醚在植物体内常共同存在，它们结构相似，酸性与极性相近，分离很困难。大黄酚和大黄素甲醚不仅具有较好的药理活性，而且大黄酚通过氧化反应可以转化为大黄酸，通过卤代和水解反应可以转化为芦荟大黄素；大黄素甲醚通过脱甲基化反应可以转化为大黄素。因此，大黄酚和大黄素甲醚单体的简单获取具有重要意义。我们在大黄的综合深加工研究中，得到了大量大黄酚和大黄素甲醚的混合物，并通过多次实验探索，找出了一种快捷、简单、高效的分离方法，现报道如下。 　　图1; 大黄中5种主要游离蒽醌类化合物的结构式（略） 　　Fig.1; The structures of five main active anthraquinones of Rheum officinale 　　1; 仪器与试剂 　　1.1; 仪器 ; 　　RE52cs旋转蒸发器（巩义市英峪予华仪器厂）；电子恒温水浴锅（深圳市国华仪器厂）；SHBⅢ 循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。 　　1.2; 试剂 ; 　　大黄酚和大黄素甲醚混合物（自制，从大黄中分离得到）；柱层析硅胶（工业级，100～200目，青岛海洋化工厂）；薄层层析硅胶G（化学纯，青岛海洋化工厂）；石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷等均为分析纯（天津市富宇精细化工有限公司）；大黄酚和大黄素甲醚对照品（中国药品生物制品检定所）。 　　2; 方法与结果 　　2.1; 薄层硅胶板的制备; ; 　　配制质量分数为0.3％的羧甲基纤维素钠(CMCNa)水溶液，与薄层层析硅胶G粉，按3 mL∶1 g的比例配制调浆，以载玻片作为载体铺板，铺好后晾干，于105 ℃下活化1 h，放入干燥器中，备用。 　　2.2; 色谱柱的制备; ; 　　取一根内径和长度合适的玻璃层析柱，用洗脱剂湿法装柱，用手轻敲柱子，使硅胶装填结实且顶端平整，有效柱长控制在20 cm左右