丹红注射液及胞磷胆碱钠注射液配伍液中酚酸类成分稳定性考察.docVIP

丹红注射液及胞磷胆碱钠注射液配伍液中酚酸类成分稳定性考察 　 作者：杜秀芳 刘伟娜 张梅兰 刘敏 李英 吴海燕 【摘要】 　　目的考察丹红注射液与胞磷胆碱钠注射液在0.9％氯化钠注射液中配伍的稳定性。方法采用反相高效液相色谱法梯度洗脱测定配伍液中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B在6 h内含量，并测定其24 h在25℃ pH值。结果主要成分丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的含量均无显著变化；丹红注射液与胞磷胆碱钠注射液配伍后24 h内pH基本稳定。结论丹红注射液与胞磷胆碱钠注射液配伍后pH值和丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B的质量在6 h内基本稳定。 【关键词】 反相高效液相色谱法 丹红注射液 丹参素 原儿茶醛 丹酚酸B 胞磷胆碱钠注射液 配伍 稳定性 　　由丹参、红花水溶液提取精制而成的丹红注射液，其有效成分主要为水溶性酚酸类成分丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B等，具有抑制血小板聚集、抗血栓形成、抗氧化及保护心脏微血管内皮细胞［1］等作用，临床主要用于治疗心脑血管疾病。丹红注射液能否与其它药物配伍应用尚未见相关文献报道。本实验模拟临床用药浓度，考察丹红注射液在25℃时与胞磷胆碱钠注射液在0.9％氯化钠注射液中配伍后pH及外观和丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B的含量的变化，为临床用药提供参考［2，3］。 　　1 仪器与试剂 　　美国Agilent1200型高效液相色谱仪，包括G1311A四元梯度泵、G1329A自动进样器、G1316A柱温箱、G1316A二极管阵列检测器、G1322A在线脱气机;TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析）。pHS-25数显pH计（上海精密科学仪器有限公司)；DK-98-1电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）。 　　丹红注射液（济南步长制药有限公司，规格：10 ml/支，批号：070139）；丹参素钠对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110855-200405）；原儿茶醛对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110810-200506）；丹酚酸B对照品（中国药品生物制品检定所，批号：111562-200504）；胞磷胆碱钠注射液（齐鲁制药有限公司，规格：2 ml: 0.25 g，批号：6100051FB）； 0.9％氯化钠注射液（石家庄四药有限公司，规格：500 ml: 4.5 g，批号：070101113）；甲醇(色谱纯,美国TEDIA公司），磷酸为分析纯，水为超纯水（Milli-Q）。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相采用二元体系，A为甲醇，B为0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱程序为：0 min（10%A，90%B），15 min（25%A，75%B），30 min（50%A，50%B），40 min（10%A，90%B）；柱温为 30℃；体积流量为1 ml·min-1，进样量为20 μl；检测波长为281 nm。色谱图见图1～4。 　　2.2 标准曲线的制备精密称取对照品丹参素钠10.4 mg、原儿茶醛11.0 mg、丹酚酸B 10.3 mg分别置10 ml容量瓶中，加50%甲醇水溶液溶解，并稀释至刻度，混匀，作为对照品储备溶液。精密吸取3种对照品贮备液适量，加50％甲醇水溶液稀释准确配制含丹参素0.8 mg·ml-1、原儿茶醛0.18 mg·ml-1、丹酚酸B 0.3 mg·ml-1的混合对照品溶液，在上述色谱条件下，分别自动进样5，10，20，40，60 μl。分别以丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B峰面积积分值（Y）为纵坐标，以质量浓度 (X，μg· ml-1)为横坐标，绘制标准曲线，得标准曲线回归方程及相关系数:丹参素为Y=9.864 5X-7.551 9,r=0.999 9, 线性范围为17.64～211.68 μg·ml-1；原儿茶醛为Y=77.35X+6.187 7,r=1, 线性范围为4.95～59.4 μg·ml-1；丹酚酸B为Y=16.852X+6.187 7,r=0.999 8,线性范围为7.73～92.7 μg·ml-1。3种定量成分在其线性范围内，线性关系良好。 　　图1 混合对照品溶液色谱图（略） 　　图2 丹红注射液色谱图（略） 　　2.3 精密度实验取标准曲线的中间浓度点，配制丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B的对照品混合溶液，连续进样测定7次，以峰面积计算3种有效成分的平均相对标准偏差RSD分别为0.64％，1.57％和0.51％。 　　2.4 重复性实验取同一批次丹红注射液（批号070139）6份，按供试品溶液的制备方法平行配制6份供试液，按“2.1” 项下色谱条件，分别进样20 μl，连续测定6次，记录色谱图和峰面积，结果表明本方法重复性良好，以峰面积计算丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的RSD