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人源抗狂犬病毒特免血浆筛查方法建立 　【摘要】 目的 用ELISA法对人源抗狂犬病毒抗体血浆进行筛查。方法 采用国内几家狂犬病毒IgG抗体诊断试剂盒（ELISA法），结合小鼠中和试验测定法，对经0、3、7、14、28日程序免疫的供浆员之血样进行抗狂犬病毒抗体效价检测。结果 与小鼠脑内中和法比较，使用不同厂家ELISA试剂盒，检测结果存在一定差异，其中C、D厂家试剂盒检测结果比较接近，线性关系较好（分别为：r＝0.997；r＝0.996），可以替代小鼠脑内中和法作为采浆站血浆初筛的方法。结论 经过反复筛选与比较，为大规模筛查抗狂犬病毒特免血浆提供了技术条件。 【关键词】 抗狂犬病毒抗体；狂犬病疫苗；ELISA；检测；中和试验 毕业论文 　Establishment of method to screening human anti-rabies virus positive plasma 毕业论文 　【Abstract】 Objective The positive human plasma containing antibody against rabies virus was screened with ELISA kit.Methods The IgG antibody diagnostic kits(ELISA method) obtaining from several manufactures in our country were adopted to screen the anti rabies virus positive plasma combining with the mice neutralization test. The level of antibody against rabies virus was determined in blood samples of donors that were immunized with rabies vaccine on days0,3,7,14and 28 in schedule.Results It showed that test results of ELISA kit produced in manufacture C and D is similar, their linear correlation is better(rc=0.997,ra=0.996 respectively).Conclusion The mice neutralization test can be replaced by ELISA kit methods. 毕业论文 　【Key words】 antibody against rabies virus；rabies vaccine； ELISA； neutralization test；screening 毕业论文 　狂犬病是一种严重危害人类生命的人畜共患疾病，主要通过带狂犬病毒的动物传播给人类，发病后致死率为100％。据卫生部2005年10月公布的数字表明，病死率仍居我国法定传染病的第2位，据调查，近年来狂犬病发病呈上升趋势，目前尚无治疗狂犬病的有效药物。虽然狂犬病抗血清对预防狂犬病起着重要作用，但其来源因系异源性蛋白而副反应较大，使用中易发生变态反应和血清病，其发生率为15％～45％［1］，而且对某些疫苗的抗体反应有抑制作用［2］，使用人源狂犬病免疫球蛋白（HRIG）则克服了上述缺点，与异源抗体相比，具有在血液中维持时间较长、保护效果好的优点，这使得HRIG的需求量越来越大［3］，为此，我们于2003年末开始进行人源抗狂犬病抗体血浆的筛查工作，目的是早日开发出安全有效的HRIG制品。但由于方法学的限制，《中华人民共和国药典2005年版三部（附录ⅪJ）》规定的小鼠效力中和试验（NIH）［4］方法难于做大规模的检测。为寻找适合的方法，笔者曾建立了间接ELISA法测定狂犬病毒抗体的方法，并进一步证实了该方法与小鼠中和法有良好的相关性，但现有ELISA法在实际应用中有灵敏度不高、且存在漏检的问题。为解决上述问题，笔者结合小鼠中和法对国内4个ELISA厂家的狂犬病毒抗体ELISA诊断试剂盒进行筛选和比较，获得了较满意的结果。 毕业论文 　1 材料与方法 毕业论文 　1.1 材料 毕业论文 　1.1.1; 狂犬病毒抗原 毕业论文 　狂犬病毒北京固定毒AG株适应地鼠肾细胞传代培养的病毒悬液经灭活初步纯化后的疫苗原液，由兰州生物制品研究所疫苗四室提供。 毕业论文 　1.1.2; ELISA检测试剂 毕业论文 　ELISA定量检测人抗狂犬病抗体诊断试剂（批号分别为