人类 HLA-DP 基因多态性及溃疡性结肠炎相关性探究.docVIP

人类 HLA-DP 基因多态性及溃疡性结肠炎相关性探究 　 作者：郭海建 刘若丹 周向京 刘新民 刘俊 熊鹰 王建平 胡银清 【摘要】 目的：从基因水平探讨溃疡性结肠炎（UC）的发病机制，并分析其与抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）及疾病分型的关系。方法：用间接免疫荧光法分 别对 86 例 UC 患者和128 例健康者进行血清 ANCA 检测 ，同时应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性核苷酸分型技术检测深圳汉族人 HLA-DPB1 基因多态性，用 PCR 技术对 HLA-DPB1 基因第 2 外显子（exon 2）进 行体外扩增 ；然后用 Ban II、Fok I、Dde I、Rsa I、EcoN I、BstUI 6 种限制性内切酶对扩增产物进行酶切，电泳分离酶切片段 ，根据片段格局 确定相应基因型别。结果：UC 患者 ANCA 的阳性率为 53.5%，对照组均为阴性；UC 患者 HLA-DPA1 等位基因频率（0.49）与对照组（0.18）比较 ，差异有 显著性（P = 0.0032，RR = 5.681， Pc = 0.033)。结论：HLA-DPA1 和 ANCA 在 UC 中阳性率均显著增加 ， HLA-DPA1 与溃疡性结肠炎有一定关联 ，溃疡 性结肠炎患者与正常人之间存在着免疫遗传异质性的差异。 【关键词】 溃疡性结肠炎；抗中性粒细胞胞浆抗体；HLA-DPA1 基因；聚合酶链反应；限制性片段长度多态性 〔Abstract〕 Objective To study HLA-DPA1 genotyping and to analyze the relationship among HLA-DP genotyping、antineutrophil oplasmic antibodies (ANCA)、clinical classification of ulcerative colitris (UC). Methods Eighty-six UC patients, 128 healthy subjects (HS) were enrolled, and serum ANCA with indirect immunoflorecence and HLA-DPAl genotypes were examined in 86 patients with ulcerative colitis and 128 healthy controls. HLA-DPAl typing was carried out by digesting the locus specific polymerase chain reaction amplified products with alleles specific restriction enzymes (PCR-RFLP), Ban II, Fok I, Dde I, Rsa I, EcoN I, BstU I. Results Positive rate of ANCA in UC patients was 53.5%. But 0.0% in HS. The allele frequency of DPA1 genotyped by polymerase chain reaction with sequence specific primers. When UC patients were divided into ANCA positive and negative groups, it is found that DPA gene positive rate was significandy higher. Conclusion In China the positive rate of HLA-DPA1 and ANCA is significantly increasing in patients with ulcerative colitis. 〔Key Words〕 Ulcerative Colitis ; ANCA HLA-DPAl gene; Polymerase chain reaction; Restrictedfragment length polymorphism 溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）是一种病因不十分明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病。发病机制复杂，与遗传 、免疫 、环境等因素有关 。西方国家流行病学的系列研究已强烈提示遗传因素在其发病中起重要作用。人类白细胞抗原（HLA）分型与 UC 的关系国内、外早有报道 ，但结果不一 ，可能与种族背景、病例选择及研究样本大小等因素有关[1]。已有资料表明 HLA-DP 基因多态性