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半仿生法提取白附子工艺探究 　 作者：曹志友　王新城　欧阳瑾　雷钧涛 【摘要】 目的优化白附子最佳提取工艺。方法以β-谷甾醇得率为指标，在提取次数、提取工艺、浸渍剂浓度等条件相同时，考虑乙醇溶液pH 值、提取时间、提取温度，选用L16(45)正交进行实验，确定最佳提取工艺。结果最佳提取工艺为第1煎提取液pH为7，第2煎提取液pH为9, 提取温度85℃,提取时间6 h。结论半仿生提取法优选白附子最佳提取工艺，方法简便，可行。 【关键词】 白附子；半仿生提取法；β-谷甾醇；正交设计 　　Abstract：ObjectiveTo optimize the semi-bionic extraction of Rhizoma Typhonii.MethodsUnder the unchanged conditions including extracting frequency, extracting course and concentration of solvent , with the yield rate of isoflavonoids of Rhizoma Typhonii as index as index, L16(45) orthogonal design was used to investigate the effects of pH, extraction temperature, and extraction time. ResultsThe first extraction pH was 7. The second extraction pH was 9. The extraction temperature was 85 ℃. The extraction time was 6 hours. ConclusionOptimization of semibionic extraction methods of Rhizoma Typhonii by orthogonal design is available. 　　Key words：White aconite; SBE law; β-sitosterol; Orthogonal design 　　白附子Typhonium giganteum Engl属天南星科植物，《神农本草经》中被列为上品。功能祛风痰，通经络，镇痉止痛，散结解毒，主要用于中风痰壅，口眼斜，半身不遂，破伤风，头痛，风湿痹痛，肢体麻木，瘰疬痰核，阴疽肿毒，毒蛇咬伤治疗。近年报道其治疗癌症效果显著。白附子可降低瘤细胞增殖率，减低瘤细胞的侵袭性，恢复机体免疫功能，对瘤细胞具有细胞毒作用［1～3］。白附子所含有效成分主要为β-谷甾醇、β-谷甾醇-D-葡萄糖苷，内消旋肌醇，胆碱，尿嘧啶，琥珀酸，棕榈酸，亚油酸，三亚油酸甘油酯，二棕榈酸甘油酯，并含白附子凝集素等易溶于醇的物质。白附子中主要有效成分β-谷甾醇( Chlorogcnic acid)具有抗肿瘤的活性，以β-谷甾醇为指标研究其最佳提取工艺是吉林省教育厅重点课题的一个主要部分。 本实验采用半仿生提取法优选白附子最佳提取工艺。 　　1 仪器与材料 紫外分光光度计（UV1100型，中国，北京瑞利分析仪器公司）；旋转薄膜蒸发仪（RE-52AA型，中国，上海亚荣生化仪器厂）；循环水式真空泵［SHZ-D(III)，中国，巩义市予华仪器有限责任公司］；电子天平（沈阳龙腾电子有限公司）；数控超声波清洗器（KQ-100DB型，中国，昆明市超声仪器有限公司）。 　　白附子的块茎（购于大千药业，由吉林医药学院雷钧涛副教授鉴定为天南星科植物Typhonium giganteum Engl的干燥块茎）。β-谷甾醇标准品（上海融禾医药科技有限公司，批号：080109），所用试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 半仿生正交实验 　　设计本文设计在提取工艺、乙醇浓度相同的条件下，用不同pH 值的乙醇进行提取，并考虑提取温度及提取时间等因素，选用L16(45)正交表安排实验。见表1。表1 因素水平（略） 　　提取液乙醇浓度为95%，第1煎、第2煎固液比均为1∶6，二煎时间比为2∶1，pH 值的调节用稀HCl 和Ca(OH)2 饱和溶液。 　　2.2 样品液的制备 　　将白附子去皮后切成碎末，称重为20 g，装入250 ml圆底烧瓶，按正交实验列号在恒温水浴中加热回流提取两次(两次回流温度均相同，加醇量均为药材量的6倍，第1 煎醇pH 值用稀HCl调至规定值，第2煎水的pH值用饱和Ca(OH)2调至规定值，醇的pH值及提取温度、提取时间按表2) 滤过，合并滤液，浓缩至浸膏（相对密度为1.12）。 　　2.3 标准曲线的绘制 　　精密称取9 mg β-