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复合bFGF缓释微球制备及性能测定 　 作者：刘锐，黄沙，金岩，吴红，姜玲，刘涛 　【关键词】 ,碱性成纤维细胞生长因子 Preparation and characteristic test of bFGFimpregnated microsphere 　　【Abstract】 AIM: To prepare the basic fibroblast growth factor (bFGF)impregnated microsphere and to study its characteristics. METHODS: The bFGFimpregnated microsphere was prepared by improved emulsified coldcondensation method. The physical properties, drug content and encapsulation were detected. The drug release in vitro was measured by ELISA. RESULTS: The average diameter of microsphere was (12.4±3.6) μm, the average drug content was 0.24% and encapsulation was 96.82%. In vitro, 28.23% of bFGF was sustainedreleased on the first day, 57.19% from the second to the fifth day and 93.94% by the seventh day. CONCLUSION: The preparation method is simple, rapid and accurate and the release of bFGF from the microspheres can be sustained for a longer time. 　　【Keywords】 basic fibroblast growth factor; microsphere; sustainedrelease; encapsulation 　　【摘要】 目的：制备复合碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的可降解缓释微球，考察其各项性能，为进一步应用于组织工程奠定基础. 方法：采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF的缓释微球，测定微球形态、粒径、载药率和包裹率等，并采用ELISA法考察其体外bFGF的缓释效能. 结果：缓释微球平均粒径(12.4±3.6) μm；平均载药率为0.24%，平均包裹率为96.82%. d 1体外释放28.23%，2~5 d时累积释放率达到57.19%, d 7时释放减慢且累计浓度为93.94%. 结论：复合bFGF的缓释微球制备工艺简便，性能优良；可在较长时间内持续释放活性bFGF，与组织工程支架的结合应用具有可行性. 　　【关键词】 碱性成纤维细胞生长因子；微球；缓释；包裹率 　　0引言 　　生长因子的应用一直是组织工程领域的重要课题之一. 它具有多种生物学活性，可提供有利于细胞生长的微环境，促进新生组织血管生成等［1］. 但由于生长因子半衰期短，溶液进入体内后迅速扩散、变性或酶解，难以保持其生物活性［2］. 我们制备复合碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)的缓释微球载体，并考察微球形态、粒径、载药率、包裹率及释放效果等性能，以期利用此种新型载体在较长时期内持续释放bFGF，为今后与组织工程支架的结合应用奠定基础. 　　1材料和方法 　　1.1材料 　　明胶(等电点50，相对分子量99 000，华美生物工程公司)，人重组bFGF溶液(25 mg/L，等电点9.6，Sigma公司)，人bFGF定量EIA试剂盒（QuantiKineR, Ramp;Dsystems），250 g/L戊二醛，丙酮，异丙醇，无水乙醚，液体石蜡，氨基乙酸为国产分析纯，Span80(Sigma公司)为进E1分析纯，水为双蒸水，JJ1型精确电子搅拌器仪，TGL16G高速离心机，GENESIS冻干机(Virtis公司)，BX41数码显微镜（Olympus). 　　1.2方法 　　1.2.1复合生长因子微球的制备将含有10 g/L Span80的液体石蜡30 mL置于三口瓶中预热至55℃，快速搅拌下滴加入同样温度的明胶水溶液4 mL，并调节搅拌速度至450 r/min，继续搅拌10 min；形成油包水乳剂后迅速改冰浴，继续搅拌10 min，使其完成固化；加入250 g/L戊二醛0.1 m