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大孔树脂对水芹菜总黄酮分离纯化探究 　 作者：唐巧玉，周毅峰，任甜甜，江曼 【摘要】 　　目的研究大孔树脂分离水芹菜总黄酮的条件。方法利用静态吸附方法筛选分离水芹菜总黄酮的最适大孔树脂，利用动态吸附方法研究最适大孔树脂分离水芹菜总黄酮的条件。结果大孔树脂AB-8是吸附水芹菜总黄酮的效果最好，最佳分离条件是：上样速率是1.5 ml·min-1，5 BV80%的乙醇以1.0 ml·min-1的速率洗脱。结论利用大孔吸附树脂AB-8在以上最佳条件下，可使9.98%水芹菜总黄酮纯度提高到25.8%。 【关键词】 水芹菜； 黄酮； 大孔树脂 　　Abstract：ObjectiveTo study the condition of separating total flavonoids in bengal waterdropwort herb with macroporous resin.MethodsUsing static absorption, optimum macroporous resin which was used for separating total flavonoids in bengal waterdropwort herb was selected. Using dynamic absorption, the condition of separating total flavonoids in bengal waterdropwort herb optimum macroporous resin was studied. ResultsOptimum macroporous resin was AB-8, and the optimum codition was as follow:the speed that sample flows through macroporous resin was 1.5 ml·min-1, and the total flavonoids absorbed on macroporous resin can eluted by 80% ethanol of 5 BV, the elution speed was 1.0 ml·min-1.ConclusionUsing upwards condition, the purity of total flavonoids in bengal waterdropwort herb can be increased to 25.8% from 9.98%. 　　Key words：Oenanthe javanica； Flavonoid； Macroporous absorbent 　　水芹菜属伞形科多年生宿根草本水生植物，别名水芹。水芹为伞形科水芹属植物水芹Oenanthe javanica (OJ)的全草，又名水英、野芹菜等［1］。其营养丰富，含有多种人体内不可缺少的营养物质，部分营养物质含量甚至超过旱芹，具有良好的食用价值［2］。同时，水芹在临床中对高血压病、高脂血症、心脑血管疾病、乙型肝炎患者具有防治作用［3，4］，其中水芹所含有的黄酮类物质发挥了重要作用。但目前的研究主要集中对水芹菜的栽培技术、育种、生产工艺、净化水体效果等方面，对于水芹黄酮的报道甚少［5，6］。本研究选水芹菜为材料基于水芹菜中黄酮类物质存在药理方面的作用，采用大孔吸附树脂法［7，8］对水芹菜黄酮类化合物进行分离纯化，筛选出一种较为合适分离纯化水芹菜黄酮的大孔吸附树脂，提高水芹菜提取物粗黄酮的纯度和生产效率，以期能得到具有高生物活性而无副作用的高纯水芹菜黄酮提取物。 　　1 材料与仪器 　　1.1 材料及处理水芹菜采于湖北民族学院后山。将新鲜水芹菜洗净，于60℃烘箱中烘干，粉碎，过孔径60目筛，装于棕色试剂瓶备用。 　　1.2 药品大孔吸附树脂NKA、NKA-9、X-5、AB-8(天津南开大学生产)；芦丁标准品(进口分装)，95%乙醇， 亚硝酸钠， 硝酸铝，氢氧化钠，以上试剂均为分析纯。 　　1.3 仪器AL204电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，LXJ-ⅡB离心机(上海安亭科学仪器厂制造)， RE-201D旋转蒸发仪(巩义市予华仪器有限责任公司)，可见光分光光度计(上海棱光技术有限公司)。 　　2 方法 　　2.1 树脂的预处理［9］将各种大孔吸附树脂，分别用95%的乙醇浸泡24 h，并不时用玻璃棒搅拌，使树脂和乙醇充分接触，以便从孔中赶出空气。将浸泡好的树脂上柱先用95%的乙醇冲洗,直至流出液无白色为止。然后用2 BV(2倍的上柱的大孔树脂的体积)的4%的NaOH冲洗，并关闭30 min，用蒸馏水洗至中性。再用2 BV的5%HCl冲洗 ，并