大豆胰蛋白酶抑制剂对人宫颈癌Hela细胞增殖影响.docVIP

大豆胰蛋白酶抑制剂对人宫颈癌Hela细胞增殖影响 　【摘要】 目的 探讨大豆胰蛋白酶抑制剂(Soybean trypsin inhibitor,SBTI )对人宫颈癌细胞（hela）体外增殖的影响。方法 选用hela细胞进行体外培养，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测SBTI对细胞增殖的影响。结果 在药物浓度为0.50～10.00　g/L浓度时，随着药物浓度的增加，随着作用时间的增加，SBTI对细胞增殖的抑制率明显增强；在光镜下可以看到细胞凋亡的特征形态。结论 SBTI对hela细胞的增殖有明显的抑制作用，呈现量效，时效关系。 【关键词】 大豆胰蛋白酶抑制剂 人宫颈癌细胞 细胞增殖 　　Abstract: Objective To study the influence of soybean trypsin inhibitor (Trypsin inhibitor.SBTI) on the human hela cells’ (Ishikawa) proliferation in vitro. Methods Hela cells were cultured in vitro and effects of SBTI on cell proliferation were measured by using methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. Results For 0.20～1.00 g/L SBTI concentration, with the increasing concentration of the drug and with the duration of the same concentration, the inhibition to cell proliferation was significantly strengthened. The characteristics of the apoptosis can be observed under the light microscope. Conclusions SBTI markedly inhibited hela cells’ proliferation on dose- effect and time- effect relationship. Key words:soybean trypsin inhibitor; the human hela cells; cell multiplication 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤。患者年龄分布 呈双峰状，35～39岁和60～64岁，平均年龄52.5岁。宫颈癌不仅发病率居于首位，近年来发病年龄有提前的趋势，探寻一种经济有效的、非手术的、能够免除平常化疗药物副作用的方法可谓当务之急。大豆胰蛋白酶抑制剂是从大豆中提取的，是指能够抑制胰蛋白酶作用的一类物质。国内外已经有文献报道大豆胰蛋白酶抑制剂具有多种药理活性，其中包括抗炎，抗病毒，抗肿瘤等。现在人们在对结肠癌，前列腺癌，乳腺癌的研究已经证明大豆胰蛋白酶抑制剂有明显的抗肿瘤作用［1-3］。大豆胰蛋白酶抑制剂已经受到人们的关注，成为研究的热点。但是国内外关于大豆胰蛋白酶抑制剂对宫颈癌的研究报道较少。本实验以细胞培养为基础，对大豆胰蛋白酶抑制剂的抗肿瘤作用进行了初步研究，通过证明大豆胰蛋白酶抑制剂对宫颈癌细胞增殖的抑制作用，以期对临床用药和开发提供科学依据，积累实验资料，现报告如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 实验材料 　　1.1.1 药品和试剂 　　大豆胰蛋白酶抑制剂为北京中医药大学细胞与生化实验室提取（浓度为98%）；RPMI-1640培养基为美国Gibco公司产品，胎牛血清为杭州四季青血清；胰蛋白酶和EDTA均购于Ameresco公司。四甲基偶氮唑蓝（MTT）、二甲基亚砜（DMSO）购于Sigma公司；HERAD—6345型二氧化碳培养箱(德国赫利氏公司)；IⅩ71倒置显微镜（日本奥林巴斯公司）;FCANF129004酶标仪(澳大利亚TECAN公司)。 　　1.1.2 细胞株 　　人宫颈癌细胞株（Hela）由北京病毒学研究所惠赠。 　　1.1.3 培养液 　　RPMI1640全培养液（RPMI1640+10％胎牛血清+青链霉素100 U/mL及100 μg/mL）。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 肿瘤细胞培养 Hela细胞使用含有10%胎牛血清的RPMI1640全培养液，在设定为37.0 ℃、5%CO2 培养箱中培养。细胞可贴壁生长，待细胞生长贴满底壁的80%左右时传代。传代时