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天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用实验探究 　 作者：张艳琼， 黄利鸣， 吴江锋 【摘要】 　　目的通过建立荷U14小鼠宫颈癌模型，从个体水平初步探索天花粉蛋白（TCS）对荷瘤小鼠体内抗肿瘤活性。方法建立荷U14小鼠宫颈癌模型，TCS治疗，检测抑瘤率、脾指数、流式细胞术分析T细胞亚群。结果TCS治疗组，脾指数明显高于阴性对照组，C较阴性对照组、CTX组明显减少（Plt;0.05）；与正常组比较无显著性差异。TCS组的C/C较阴性对照组、正常组明显增大（Plt;0.05）；与CTX组比较无显著性差异。结论在体内，当TCS的剂量为0.2 mg/kg时，具有一定的免疫调节和增强体液免疫功能作用。 【关键词】 天花粉蛋白 荷瘤鼠 抑瘤作用 　　Abstract：Objective To study the anti-tumor effect of trichosanthin(TCS) in U14 mice.MethodsAfter setting up the animal model of U14, the subset of the T cells was analyzed by the tumor inhibitory rate, the index of spleen and FCM. ResultsAfter treatment with TCS, the index of spleen was increased obviously compared with the negative group, the C decreased obviously compared with the negative and CTX groups（Plt;0.05）, but had no significant difference as compared with the normal group. The C/C in TCS group was increased obviously compared with the negative and normal groups（Plt;0.05）, but had no siguificant difference as compared with the CTX group.ConclusionThe TCS can regulate immunity and increase the humoral immunity in vivo when its dose is 0.2 mg/kg. 　　Key words：Trichosanthin; Mice with tumor; Effect of tumor- inhibition 　　人子宫颈癌是导致妇女死亡的一种常见恶性肿瘤。天花粉蛋白（trichosanthin，TCS)是从葫芦科植物栝楼trichosanthin kirilouii Maxim的块根中提取的一种单链核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating protein，RIP)。体外大量实验证实其具有抗宫颈癌的作用［1，2］，为进一步证实TCS是否具有体内抗宫颈癌和调节机体免疫的活性，我们进行了TCS对荷小鼠宫颈磷癌U14裸鼠体内实验研究。 　　1 材料 　　1.1 材料TCS购自上海金山制药厂（1.2mg/ml）；环磷酰胺购自江苏恒瑞医药股份有限公司； RPMI-1640培养基购自Gibcol公司；PE标记C抗体购自eBioscience公司；FITC标记C抗体购自eBioscience 公司；倒置显微镜和多功能显微镜及图像分析系统购自德国Leica公司；EPICSXL-4型流式细胞仪购自Beckman coulter公司。U14肿瘤细胞株由三峡大学医学院免疫重点实验室提供。 　　1.2 动物6～8周龄近交系Balb/c小鼠32只，体质量18～20 g，雌性，购自武汉大学实验动物中心。 　　2 方法 　　2.1 TCS对实体瘤的抑制作用复苏U14细胞株，昆明小鼠腹腔中反复传代，第3代后5～7 d，取小鼠腹水，用无菌生理盐水调整细胞浓度为2×107/ml。常规消毒后，取0.2 ml细胞悬液接种于Balb/c小鼠右侧腋窝皮下。接种后的小鼠随机分3组：TCS实验组、阴性和阳性对照组，每组8只。TCS实验组：用生理盐水稀释TCS注射液，药物浓度为0.2 mg/kg，0.2 ml/只，给药1次/d，连续给药10次。阳性对照组：环磷酰胺（cytoxan, CTX），30 mg/kg。阴性对照组给予等体积的生理盐水。另设正常组8只，不进行任何处理。 　　2.2 组织取材和称重第11天称小鼠体质量。眼球取血，置于加有抗凝剂的试管内。处死小鼠，取出肿瘤组织、脾脏，称瘤