头孢他啶及中药制剂联合应用对铜绿假单胞菌体外抗菌活性探究.docVIP

头孢他啶及中药制剂联合应用对铜绿假单胞菌体外抗菌活性探究 头孢他啶与中药制剂联合应用对铜绿假单胞菌的体外抗菌活性的研究 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）是假单胞菌中最常见的条件致病菌，是我院培养分离出的前三个病原菌之一。PA感染难以治疗，甚而产生多重耐药、泛耐药菌株，有相当部分原因是因为铜绿假单胞菌的耐药机制十分复杂。当单一抗菌药物的使用无法有效的治疗铜绿假单胞菌感染时，临床通常选择不同作用机制的抗菌药物联合应用来治疗PA感染，以减少单一药物大剂量应用时的毒副作用，以及减少和延缓耐药菌株的产生。丁力等[1]评价了异帕米星分别与头孢他定、头孢吡肟、美洛培南联合用药对临床分离获得的PA的体外抑菌活性，发现上述药物联用后，明显起到增效作用，主要表现为协同和相加作用。另有研究[2]表明头孢他啶与环丙沙星的联合对多重耐药PA的敏感率为88.46%，哌拉西林他唑巴坦与环丙沙星联用对多重耐药PA的敏感率为84. 26%。 　除了各种抗菌药物之间联合应用治疗铜绿假单胞菌感染外，同样有研究表明，中药能够增加抗菌药物的效应，提高菌株对抗菌药物的敏感性。任玲玲等[3]研究表明，中药复方制剂能降低大肠埃希菌多重耐药基因表达水平；而芦亚君等[4]研究中药复方制剂能使产超广谱beta;-内酰胺酶大肠杆菌部分或全部逆转对抗菌药物的耐药性的作用。中西药物的联合应用研究被逐渐提上议事日程。通过中西药物联合应用来达到提高抗菌药物使用疗效，缩短住院时间，降低耐药率的目的。铜绿假单胞菌是一种常见的医院内获得性感染的条件致病菌，我院通常选择静脉注射类抗菌药物治疗PA感染，头孢他啶在美国FDA 核准的临床微生物实验室在非苛养菌常规试验和报告中应考虑的抗微生物药物推荐分组中，是首先被推荐用于治疗铜绿假单胞菌的药物，故本研究选用头孢他啶与临床常用中药制剂双黄连注射液、热毒宁注射液、喜炎平注射液联用，观察对铜绿假单胞菌有无协同抗菌作用。 1 资料与方法 　1.1一般资料 收集2010年9月～2011年8月我院临床分离的68株PA，全部菌株采用VITEK 32型全自动微生物分析仪，GNI鉴定卡进行鉴定。68例住院患者中，男50例，女18例；年龄38～96岁，平均（68plusmn;13）岁；60岁以上44例，占64.71%。 　1.2培养基和抗菌药物 Mueller Hinton肉汤培养基（以下简称MH培养基）（江苏宜兴市永信生物有限公司，批号；头孢他啶（广州白云山天心制药股份有限公司，批号：101130）；双黄连注射液（1mL相当于1g生药）（河南福森药业有限公司，批号：100734）；热毒宁注射液（1mL药液含栀子9～14mg和绿原酸5.6～8.4mg）（江苏康缘药业股份有限公司，批号：100807）；喜炎平注射液（江西青峰药业有限公司，批号。 　1.3实验仪器 SW-CJ-ICU洁净工作台（苏州安泰空气技术有限公司）；电热恒温培养箱（型号：HH-BII-360-S，上海跃进医疗器械厂）；手提式不锈钢蒸汽消毒锅（型号：YX20B）。 　1.4 微量棋盘稀释法 　1.4.1原理 将甲乙两药的各种稀释度加以组合，组成联合药敏板。同时两种药物每一稀释度都有一个加单一药物的单独药敏孔。根据单一药物对被检菌的MIC和联合药敏板中的抑菌情况，可精确测定两药在适当浓度比例下所产生的相互作用。 　1.4.2 实验步骤 　1.4.2.1确定单药的MIC。 　1.4.2.2确定联合药敏的药物稀释度 ①每一稀释度浓度为联合药敏孔内所需单药终浓度的2倍；②用MH液体培养基将甲乙两药稀释6～8个稀释度。 　1.4.2.3加甲、乙两药（分别从横、竖排加入） 每孔各50ul，横排和纵排的第1孔为无药对照，第1排为单药对照管。见图1。 　1.4.2.4加待测菌液 ①各管加入被检菌液100ul；②菌液终浓度：105CFU/mL。 　1.4.2.5将塑料96孔板放入37℃孵育过夜。 　1.4.2.6结果判读：FIC：部分抑菌浓度指数。 　FIC指数=甲药联合时MIC/甲药单独时MIC+乙药联合时MIC/乙药单独时MIC 　FIC指数le;0.5为协同作用；0.5lt;fic指数le;1.0为相加作用；1.0lt;fic指数le;2.0为无关作用；fic指数gt;2.0为拮抗作用[1]。 　2 结果 　采用头孢他啶和热毒宁注射液联用，以相加（11.76%）和无关（58.82%）作用为主，以协同（10.29%）和拮抗（8.82%）为次。采用头孢他啶和喜炎平注射液联用，所有FIC均大于2，以拮抗（100%）作用为主，无协同、相关及无关作用。采用头孢他啶和双黄连注射液联用，以无关（36.76%）和相加（20.59%）作用为主，以协同（11.76