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威灵仙类药材中多糖含量比较 　 作者：王祥培，黄婕，靳凤云，吴红梅，孙宜春，阳涛 【摘要】 　　目的探讨威灵仙类药材中多糖含量的差异。方法采用苯酚-硫酸比色法测定威灵仙类药材中多糖的含量;测定波长487 nm。结果威灵仙类药材中多糖含量有明显差异。结论应注意品种、生长环境等因素对药材质量的影响。 【关键词】 威灵仙类药材　多糖　苯酚-硫酸比色法 　　Abstract：ObjectiveTo compare the contents of polysaccharides in medicinal materias of Weilingxian.MethodsThe polysaccharides content of medicinal materias of Weilingxian was determined by Phenol-sulfuric acid colorimetry. The detection wavelength was 487 nm.Results There was apparent difference in polysaccharides content of medicinal materias of Weilingxian. ConclusionAttention must be paid to the effects of varieties and environment on the quality of medicinal materias. 　　Key words：Medicinal materias of Weilingxian; Polysaccharides; Phenol-sulfuric acid colorimetry 　　威灵仙为毛茛科植物威灵仙Clematis chinesis Osbeck.、棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.和东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎，具有祛风除湿、通络止痛之功效，主要用于治疗风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，屈伸不利，骨哽咽喉等症状［1］，是古今中医临床常用的祛风湿止痛药。在贵州地区作商品威灵仙药材的品种繁多，除药典收载品种外，其中同科植物柱果铁线莲Clematis uncinata Champ.、山木通Clematis finetiana Levl的根及根茎为药材威灵仙的主要来源［2］。威灵仙含有多糖、皂苷等多种重要活性成分［3，4］。目前，已有威灵仙类药材中总皂苷及齐墩果酸含量的比较报道［2，5］。但比较具有抗氧化作用的威灵仙多糖含量的研究未见报道。因此，本文采用苯酚-硫酸比色法测定威灵仙类药材中多糖的含量并作比较和分析，以期为威灵仙类药材资源的合理开发利用提供参考。 　　1 仪器与试药 UV-2501型紫外可见分光光度计（日本岛津），80-2B离心机（湖南星科科学仪器），RE-52A 旋转蒸发仪（上海亚荣），循环水式真空泵（上海亚荣），数显恒温水浴锅（常州澳华），DZF-6020MBE型真空干燥箱（上海博讯实业），METTLER AB204-S型电子天平（美国梅特勒-托利多）。 无水葡萄糖（天津科密欧，分析纯，批，乙醇，苯酚，浓硫酸，正丁醇，无水乙醇，丙酮，乙醚等试剂均为分析纯。柱果铁线莲Clematis uncinata Champ.根及根茎，威灵仙Clematis chinesis Osbeck根及根茎，山木通Clematis finetiana Levl. 根及根茎，均由贵阳中医学院王祥培副教授鉴定。 　　2 方法与结果 　　2.1 多糖的提取与精制称取已干燥的混合粉末（威灵仙、柱果铁线莲、山木通的粉末各30 g）90 g，置圆底烧瓶中，加入80%乙醇1 000 ml，90℃回流提取2 h，抽滤，滤渣挥干溶剂后，滤渣加15倍量蒸馏水，于沸水浴回流提取2 h，双层滤布过滤，残渣加15倍量蒸馏水，沸水浴重复提取1次，合并两次滤液，减压浓缩至200 ml，放冷，加入适量醋酸乙酯于50 ℃保温脱脂20 min，减压回收醋酸乙酯，用Sevage法除蛋白，反复进行8次至无蛋白层。除蛋白后的提取液加入终浓度为3%的过氧化氢，于50 ℃下保温脱色30 min。放冷后，加入乙醇至含醇量为85%，于4 ℃下静置过夜，再离心分离（3 000 r/min ，10 min），沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚各淋洗3次，60℃真空干燥至恒重，即得精制的混合多糖1.614 6 g(得率1. 79%)，密封保存备用。 　　2.2 精制多糖的鉴别取混合多糖2 mg，用蒸馏水10 ml溶解后精密吸取1 ml至具塞试管中，加入1 ml α-萘酚溶液，混匀后沿试管壁加入浓硫酸溶