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宁心红杞胶囊高效液相色谱指纹图谱探究 　作者：汪光林，王坚，吕晔，孟长虹，陆益红 【摘要】 　　目的建立宁心红杞胶囊HPLC 指纹图谱分析方法。方法采用kromasil C18色谱柱, 乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速1.0 ml/min，柱温30℃，检测波长205 nm。结果对10个批号的样品进行了测定，标出21个共有峰。结论 该法快速、准确、可靠，为宁心红杞胶囊生产质量控制和药物质量评价提供了依据。 【关键词】 宁心红杞胶囊；高效液相色谱；指纹图谱 　　Abstract：ObjectiveTo establish a method of fingerprint analysis of Menoprogen by HPLC. MethodsKromasil C18 column was used，with mixtures of 0.1% phosphoric acid and acetonitrile as mobile phase in a gradient elution. The flow rate was 1.0 ml/min，the column temperature was 30℃，detection wavelength was 205 nm.ResultsTen different samples were determined and 21 common peaks of chromatogram were detected . ConclusionThis method is quick,accurate,reliable and can be used for quality control of menopenry. 　　Key words：Menoprogen； HPLC； Fingerprint 　　中药复方的药效是来自于组成该复方的各种成分之间的协同作用，因此中药复方具有成分非常复杂的特点，现行的仅以其中的一种和/或两种化学成分的含量来作为评价中药质量的方法已越来越不合时宜。如何确保复方中药质量的稳定性和一致性已经成为大家关注的焦点。随着分析技术的发展，建立具有综合性、整体性特点的指纹图谱对中药复方制剂进行质量评价的方法已经成为可能并得到了普遍认同，我国食品药品监督管理局也于2000年要求将色谱指纹图谱作为中药注射剂的评价标准。宁心红杞胶囊是由枸杞子、熟地黄、桑椹、红花、山楂5味药组成，该制剂是一种治疗“围绝经期综合征”方剂［1］，不但具有组方简单的特点，而且临床疗效确切，但目前国内外还没有关于宁心红杞胶囊指纹图谱的研究，本研究在严格考察了实验方法的基础上建立了宁心红杞胶囊HPLC指纹图谱分析方法，为宁心红杞胶囊生产质量控制和药物质量评价提供了依据。 　　1 仪器与试药 Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪( G1311AQuaternary Pump，G1379A Degasser，G1313A Autosampler，G1314A Variable Wavelength Detector)；HP ChemSation 工作站( 美国Agilent公司)；KQ-250DE型医用数控超声波清洗器(昆山超声波仪器有限公司)；Sartorius电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司) 。 金丝桃苷(批号111521-200303，中国药品生物制品检定所)；宁心红杞胶囊样品由南京美福天然药物科技有限公司提供。 甲醇、乙腈(韩国SK chemicals 公司生产) 为色谱纯；磷酸（南京化学试剂有限公司生产）为分析纯；水为自制重蒸水。 　　2 方法与结果 　　2. 1 色谱条件Kromasil C18(4.6 mm× 250 mm，5 μm)色谱柱，Phenomenex fusion-Rp C18(4.0 mm×3.0 mm)保护柱，柱温30℃，流速1 ml/min；检测波长205 nm，乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱，洗脱程序(见表1)。在选定条件下，金丝桃苷和相邻组分色谱峰分离度大于1.5，按金丝桃苷峰计算，理论塔板数在4 500以上，运行150 min，色谱图显示所有组分均在135 min内洗脱出柱。表1 流动相梯度变化程序（略） 　　2. 2 检测波长的选择本实验采用二极管阵列紫外检测器,在分析时进行全波长紫外扫描，并在不同波长下获取数据，经比较后表明205 nm色谱图出峰数目最多，峰形最好，基线平，各色谱峰相互之间分离度较好，故检测波长定为205 nm。 　　2. 3 溶液的制备 　　2. 3. 1 供试品溶液的制备精密称取宁心红杞胶囊内容物1 g，置10 ml容量瓶中，加甲醇适量，浸泡2 h，超声处理30 min，甲醇定容至刻度，摇匀，过滤，进样前取续滤液用0