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宽叶缬草醚酯提取物体外抗氧化活性探究 　 作者：黄凌，黎继烈，杨杰，崔培梧，文蓉 【摘要】 目的探讨缬草醚酯提取物体外抗氧化活性。方法采用DPPH法、邻苯三酚自氧化法、水杨酸法，分别测定缬草醚酯提取物清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的能力。结果样品中活性物质对于DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基等自由基半清除率浓度(IC50)分别为1.36，1.46和2.14 mg/ml。结论在实验条件下，缬草醚酯提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子有较好的抑制作用。 【关键词】 宽叶缬草; 自由基; 抗氧化活性 　　Abstract：ObjectiveTo study the antioxidant activity in vitro of ether and grease extract from Valeriana offeinalis L.Methods The methods of DPPH , pyrograllol auto-oxidation and salicylicl acid were used in order to get the scavenging quality of DPPH free radical(DPPH·) , superoxide free radical (O2-·) and hydroxyl free radical (OH·) in the methanol extract of Valeriana offeinalis L . ResultsThe half maximal inhibitory concentration(IC50) of sample on DPPH· , O2-· and OH· were 1.36 ，1.46 and 2.14 mg/ml . ConclusionThe extract has good scavenging effect on DPPH·, OH· and O2-· under the condition of experiment. 　　Key words： Valeriana offeinalis L. ; Free radicals; Antioxidation 　　缬草属Valeriana L.约有250种，分布于欧亚大陆、南美和北美中部。缬草可作香料、药用及观赏，缬草的药理作用主要是镇静安神、解痉镇痛[1]、改善微循环[2]、抗抑郁和抗肿瘤作用[3]等。多数缬草属植物的根茎及发达的须根含有环烯醚酯等化学成分，有良好的药用价值，在民间有作药用的历史[4]。 　　本实验采用DPPH法、邻苯三酚氧化法、水杨酸法检测缬草醚酯提取物对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(OH·)的清除能力。 　　1 材料与仪器 　　1.1 样品制备宽叶缬草Valeriana offeinalis L.采于湖南湘西自治州，取其根，除杂备用。称取缬草根材料100 g，加入2 g CaCO3,300 ml蒸馏水于高速捣碎机中粉碎后移入1 000 ml三角瓶中超声处理20 min。 加入300 ml乙醚、醋酸乙酯混合液(1∶1)于三角瓶中，于25 ℃下振荡萃取2 h(密封)。抽出上层混合液，真空浓缩至膏状取出，冷冻干燥。所得膏状物用无水乙醇复溶于50 ml容量瓶制成20.0 mg/ml样品溶液，于4 ℃温度下保存备用。 　　1.2 仪器UV-1700型紫外分光光度仪(日本 岛津上海有限公司);R201D-Ⅱ型旋转蒸发仪(郑州 长城科工贸有限公司);JJ-2B型电动高速捣碎机(江苏 荣华仪器制造有限公司);AS 2060B型超声清洗器;FD-1A型冷冻干燥机(北京 博医实验仪器公司)。 　　1.3 试剂1，1-二苯基苦基苯肼(DPPH)(Sigma 公司);抗坏血酸、茶多酚、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、邻苯三酚、水杨酸、硫酸亚铁、无水乙醇、乙醚、醋酸乙酯、浓盐酸、双氧水(30%)等均为国产分析纯。 　　2 方法 　　2.1 缬草醚酯提取物清除DPPH·自由基能力测定DPPH自由基清除实验参照彭长连等[5]方法，并依据缬草提取物成分特性对具体操作做出改动。DPPH溶液的配制：准确称取19.70 mg DPPH用无水乙醇溶解并定容于250 ml容量瓶中，DPPH浓度为2.0 × 10-4 mo1/L，避光保存(0 ～ 4℃)。 　　取样品溶液2.0 ml稀释10倍后移入25 ml三角瓶中。分别移取200，400，600，800，1 000 μl稀释液于试管中，用无水乙醇补足到2.0 ml后编号。每支试管各加入2.0 × 10-4 mol/L DPPH溶液2.0 ml均匀混合，在28 ℃下避光静置30 min。以无