川芎嗪对大鼠脑缺血-再灌注肝损伤影响.docVIP

川芎嗪对大鼠脑缺血/再灌注肝损伤影响 　【摘要】 目的: 观察川芎嗪对大鼠脑缺血-再灌注肝损伤的影响。方法: 采用Pulsinelli的方法建立大鼠急性全脑缺血/再灌注模型。将Wistar大鼠随机分为3组，即假手术对照组、缺血/再灌注组（ I/ R）和川芎嗪+ 缺血/ 再灌注组（ TMP + I/ R） ，分别测定各组肝组织超氧化物歧化酶（ SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-PX）、丙二醛（MDA）、Ca2 +-Mg2 +-ATP酶的含量及肝细胞形态学变化。结果:川芎嗪治疗组肝组织MDA含量明显低于缺血/再灌注组（ P lt; 0. 01） ， SOD， GSH-PX， Ca2+-Mg2+-ATP酶的含量均明显高于缺血再灌注组（ P lt; 0. 01） ，肝细胞形态学异常变化明显减轻。结论:川芎嗪能减少大鼠脂质过氧化，改善ATP酶的功能，减轻大鼠脑缺血/再灌注所致肝脏损伤。 【关键词】 川芎嗪;脑; 缺血/再灌注;肝损伤 　　川芎嗪（ Tetramethylpyrazine， TMP）是从川芎中提出的一种生物碱，具有解痉、扩管、降压等广泛的生物作用，已泛应用于心血管疾病的治疗。岑得意等［1］用大鼠脑梗塞模型观察川芎嗪对大鼠脑梗塞的作用，结果显示川芎嗪可显著改善大鼠异常神经症状和抑制ALP活性的下降，显著抑制ADP致血小板的聚集。笔者以往的研究表明［2］，川芎嗪对脑缺血/再灌注损伤具有保护作用，TMP可减少脑缺血/再灌注损伤中皮层和海马NO 的生成，降低NO的损害作用，从而对脑缺血产生保护作用，对癫痫大鼠模型神经细胞的损伤具有保护作用［3，4］。脑缺血/ 再灌注损伤是重型颅脑损伤病人减压术后的一种常见病症，由此而引发的多脏器功能损害更使病情复杂化，增加了救治难度。肝脏作为最易受累的器官之一，在临床和实验中受到人们的高度重视。于是我们采用Pulsinelli 等的方法建立大鼠急性全脑缺血/ 再灌注模型，旨在研究川芎嗪对大鼠脑缺血/再灌注肝损伤的作用，并探讨其可能机制，从而为临床预防和治疗脑缺血/ 再灌注损伤提供实验依据。 　　1材料与方法 　　 　　1.1药品及试剂川芎嗪注射液40mg/2 mL （北京第四制药有限公司生产，批，SOD， GSH-PX，MDA， Ca2+-Mg2+-ATP酶试剂盒（北京中山生物技术有限公司生产）。 　　1.2实验动物与分组健康雄性Wistar大鼠48只（广州医学院动物中心提供），体重200～250 g ，随机分成3组（n = 16） ，即假手术对照组、缺血/ 再灌注组（ I/ R） 及川芎嗪+缺血/ 再灌注组（ TMP + I/ R） ，于术前30 min经尾静脉给予川芎嗪8 mg/kg，其余两组同时给予等体积生理盐水。 　　1.3模型制备与标本采集缺血/ 再灌注组和川芎嗪+ 缺血/ 再灌注组按Pulsinelli等的方法建立大鼠急性全脑缺血/再灌注模型，即20 %乌拉坦2 ml/ kg 腹腔麻醉，电灼凝固双侧椎动脉，夹闭双侧颈总动脉，造成全脑缺血，30 min 后松夹，开放双侧颈总动脉灌流60min。对照组仅做动脉分离，不进行电凝和夹闭。全部动物于实验1.5h末经髂动脉取血并迅速放血致死，取肝左中叶组织匀浆，同时取少许肝左中叶组织行光、电镜观察。 　　1.4指标测定SOD活性用邻苯三酚自氧化法检测［5］，MDA含量测定用改良硫代巴比妥酸（ TBA）比色法测定［6］， 5. 5，二硫对二硝基苯甲酸（DTNB）比色法测定GSH-PX［7］，定磷法测定Ca2+-Mg2 +-ATP酶［8］。光镜检查:取肝组织经10%甲醛固定，石腊包埋切片， HE染色，观察切片。电镜检查:肝组织用生理盐水漂洗后2. 5%戊二醛固定，送电镜室，经四氧化锇双固定，脱水、包埋、切片等操作后，在日立H-600透视电镜下观察并拍片。 1.5统计学分析所有数据均用均数±标准差（ x±s）表示，组与组之间采用t 检验。 　　2结果 　　2.1肝组织中SOD、GSH-PX及MDA含量的变化大鼠脑缺血/再灌注后肝组织SOD、GSH-PX活性下降，而MDA含量明显上升，与假手术对照组比较有显著性差异（ P lt; 0. 01） 。 川芎嗪治疗组肝组织中MDA含量明显低于缺血再灌注组（ P lt; 0. 01） ， SOD、GSH-PX的含量均明显高于缺血再灌注组（ P lt; 0. 01）。见表1。 　　表1 各组大鼠肝组织SOD、GSH-PX、MDA、Ca 2 +-Mg2 +-ATP酶的测定结果（略） 　　注: △与假手术对照组比较， P lt; 0. 01; * 与缺血再灌注组（ I/R）比较， P lt;0. 01。 　　2.2肝组织ATP 酶活性变化大鼠肠缺血再灌注后肝组织Ca2 +-Mg2 +-ATP酶活性