悉通颗粒治疗急性痛风性关节炎实验探究.doc

悉通颗粒治疗急性痛风性关节炎实验探究 　作者：钱小奇 钱卫东 陈红 张永锋 杨敏 昝沁 【摘要】 目的：观察悉通颗粒对急性痛风性关节炎的抗炎镇痛作用。方法：将 32 只雌性 Wistar 大鼠随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱组（阳性对照）、悉通颗粒组，每组各 8 只。于实验第 3 天灌胃前进行急性痛风性关节炎的造模。造模前软皮尺测量各鼠右后肢踝关节周径，造模 24 h 后观察各鼠步态。造模 72 h 后在相同部位测量关节周径。造模 72 h 后处死动物，取下其受试关节软组织显微镜观察普通病理变化。结果：和模型组比较，秋水仙碱组、悉通颗粒组均能改善模型大鼠的步态（P lt; 0.05）；秋水仙碱组和悉通颗粒组均能缩小关节周径（P lt; 0.05）；秋水仙碱组和悉通颗粒组对关节软组织炎性细胞浸润、水肿均有改善。结论：悉通颗粒对急性痛风性关节炎具有确切的抗炎镇痛作用。 【关键词】 悉通颗粒；痛风性关节炎；实验研究 痛风（gout）是嘌呤代谢障碍所致的一组异质性慢性代谢性疾病，其临床特点为高尿酸血症、反复发作的痛风性急性关节炎、间质性肾炎和痛风石形成；严重者关节畸形及功能障碍，常伴尿酸性尿路结石。根据痛风的临床特点，结合传统中医药的辨证论治理论，我们采用悉通颗粒治疗急性痛风取得了良好的临床疗效，为进一步探究其药理作用，我们进行了悉通颗粒对急性痛风性关节炎的抗炎镇痛作用的实验研究。 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 动物 SPF 级雌性 Wistar 大鼠，体重180~220 g，广州中医药大学实验动物中心提供，实验动物质量合格证号：0028063。 1.1.2 治疗药物及试剂 悉通颗粒（由山慈菇、车前子、土茯苓等药物组成），由深圳市第二人民医院第一门诊部中药房提供。按比例将原方药物置于搪瓷药罐中，以 1:10 加入蒸馏水浸泡 2 h，加热煮沸 30 min，滤出头煎，药渣加蒸馏水适量，再煮沸 30 min，滤出二煎，合并二次滤液，浓缩成 200% 置冰箱。尿酸钠，Sigma 公司，规格：5 g/瓶，批号：120K5305，配制成 2.5 g%。阳性对照药（秋水仙碱）：昆明制药集团股份有限公司，规格：每片含秋水仙碱 1 mg，产品批号配制成 0.1 mg/mL。 1.2 实验方法 1.2.1 急性痛风性关节炎的造模 参照 Coderre 等的经典方法略作改进[1]。以碘酒、乙醇消毒局部，用 6 号灭菌注射针在大鼠右侧距小腿（踝）关节背侧，从 45（°）方向插入至胫骨肌腱内侧，将尿酸钠溶液 0.2 mL（浓度为 2.5 g / 100 mL）注入到踝关节腔。空白对照组注射 0.2 mL 生理盐水。 1.2.2 动物分组与给药 将 32 只大鼠随机分为：空白对照组、模型组、秋水仙碱组（阳性对照）、悉通颗粒组。每组各 8 只。给药剂量分别为：悉通颗粒组：每只 20 g/kg；阳性对照组（秋水仙碱）：每只 1 mg/kg ；空白对照组、模型组：同体积生理盐水灌胃。每天灌胃给药 1 次，连续给药 5 d。于实验第 3 天灌胃前按上述方法造模。 1.2.3 观察指标 1.2.3.1 踝关节周径和步态 造模前软皮尺测量各鼠右后肢踝关节周径，造模 24 h 后观察各鼠步态。造模 72 h 后在相同部位测量关节周径。步态分级标准：0 级： 正常行走，记 0 分；Ⅰ级：轻微跛行， 受试下肢略有弯曲，记 1 分；Ⅱ级： 中度跛行，受试下肢刚触及地面，记 2 分；Ⅲ级：重度跛行，受试下肢离开地面，三足着地行走，记 3 分。 1.2.3.2 病理学观察 造模 72 h 后处死动物，取下其受试关节软组织放入甲醛中固定，石蜡包埋，HE 染色，显微镜观察普通病理变化。 1.2.4 统计学处理 多组间均数进行单因素方差分析和两两比较，均采用 SPSS 10.0 统计软件处理。 　 2 结 果 2.1 药物对步态变化的影响 造模 24 h 后观察各鼠步态及记分。和模型组比较，秋水仙碱组、悉通颗粒组均能改善模型大鼠的步态（均 P lt; 0.05），结果见表 1。 2.2 药物对关节周径的影响 造模 72 h 后在相同部位测量关节周径。造模前 4 组大鼠的关节周径无显著性差异（P gt; 0.05）。造模后各造模组关节周径均比空白对照组升高（P lt; 0.05），但与模型组比较，秋水仙碱组和悉通颗粒组均能缩小关节周径（P lt; 0.05）。结果见表 2。 2.3 药物对关节软组织病理变化的影响 正常的关节软组织无炎细胞浸润（见图 1）。模型组关节软组织炎症及充血明显，炎细胞浸润，红细胞渗出，成纤维细胞及小血管增生，纤维炎性蛋白渗出物（见图 2）。秋水仙碱组关节软组织细胞增生、变性，其间为