抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β.doc

抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β 　 作者：骆群，吕明，于鸣，黎燕 【摘要】 为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征，利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC，检测淋巴细胞转化，CD8+CD25+细胞比例和肿瘤生长因子β（TGF-β）表达等相关免疫学指标。结果表明，在抗CD28抗体的协同作用下，抗CD3抗体的刺激活性明显提高，CD8+CD25+细胞比例明显增加，TGF-β的表达下调。结论： 抗CD28抗体协同刺激可以提供第二信号，使T淋巴细胞充分活化，TGF-β表达水平明显下降 【关键词】 抗CD3抗体 　　Anti-CD28 Antibody Costimulation Enhances Anti-CD3 antibod Activating T Cells and Lowering TGF-β Expression in Vitro 　　Abstract In order to study how to activate T cells and their immunological characteristics，the anti-CD3 and anti-CD28 McAbs were used to stimulate PBMNC，then their related immunological changes，such as lymphocyte transformation function，the percentage of CD8+CD25+ cells and TGF-β expression were delected by lymplocyte transformation assay，flow cytometry and RT- PCR respectively. The results showed that in costimulation with anti-CD28 antibody stimulathetion，the activity of anti-CD3 antibody was significantly enchanced，the ratio of CD8+CD25+ cells of T cells was obviously increared，while TGF-β expression was down-regulated. It was concluded that the anti-CD28 antibody costimulation could provide stimulatory signal Ⅱ，which make T cells more active，while the expression of TGF-β significantly down-regulated. 　　Key words anti-CD3 antibody; anti-CD28 antibody;TGF-β;T cell T淋巴细胞在人体免疫系统中扮演重要的角色，其在体内处于抑制或耐受状态会导致免疫力下降，从而引起感染与肿瘤等发生。近年来人们一直探讨体将外诱导活化的T淋巴细胞用于过继免疫治疗。T细胞活化需要TCR/CD3识别APC表面的MHC-肽复合物提供的第一信号以及CD28/B7、LFA-1/ICAM-1等协同刺激分子相互作用提供的第二信号。目前国内外多用抗CD3抗体体外激活T细胞，将CD8+CD25+杀伤性T淋巴细胞回输治疗免疫力下降引起的感染与肿瘤［1，2］。但是研究表明，T淋巴细胞在接受第一信号之后，如果不能接受第二信号的刺激，则将迅速呈低反应性或失能。在抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞的同时，提供第二信号对T淋巴细胞的活化以及后续的体内回输治疗具有重要意义。T淋巴细胞表面的协同刺激分子CD28与其配体B7的相互作用是为T淋巴细胞活化提供第二信号的主要途径之一，近年来已有报道利用抗CD28抗体协同抗CD3抗体体外扩增活化T淋巴细胞［3，4］。 抗CD3抗体刺激T淋巴细胞后，会介导T淋巴细胞分泌TGF-β。近年来研究提示，TGF-β在介导体内长期免疫耐受的过程中起着关键性作用［5，6］。作为一个有效的免疫抑制因子，TGF-β可使肿瘤细胞逃避宿主的免疫监视，成为肿瘤的一道屏障，这可能是过继性免疫治疗肿瘤后易复发的一个重要原因［7-9］。 本研究在抗CD3抗体体外模拟T淋巴细胞活化的第一信号的同时，利用抗CD28抗体模拟第二信号协同激活T淋巴细胞，增强了抗CD3抗体体外活化T淋巴细胞的功能；与此同时，研究发现在抗CD28抗体协同刺激下TGF-β的表达水平出现明显地下降。 　　材料和