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氢溴酸后马托品原位凝胶刺激性及药效学探究 　 作者：姜新东，王强，王彤，孙柏旺 【摘要】 目的：研究氢溴酸后马托品原位凝胶的眼刺激性和药效作用。方法：18只家兔被随机分为两组，分别进行眼刺激性试验和药效学研究。每组再分成氢溴酸后马托品原位凝胶组、氢溴酸后马托品滴眼液组和生理盐水对照组3个亚组，裂隙灯显微镜观察眼局部反应情况，斜视尺测量不同时间点瞳孔直径。结果：氢溴酸后马托品原位凝胶多次给药后，裂隙灯显微镜观察家兔眼角膜无混浊，虹膜和结膜未见红肿、充血、肿胀等异常现象。组织病理学检查显示，家兔眼给药后，与生理盐水组相比，给药组组织病理学改变无明显差异。药效学结果显示，氢溴酸后马托品原位凝胶散瞳时间长达8 h。结论：氢溴酸后马托品原位凝胶是安全的，并能够有效地延长药物释放时间。 【关键词】 原位凝胶； 刺激性； 氢溴酸后马托品； 药效学 近年来，随着生物药剂学的发展和眼部用药后药物动力学研究的深入，发现溶液剂存在滞留时间短、生物利用度低等问题［1］，如滴眼剂滴入眼内后，由于眼睑的眨动和泪液的分泌，只有1%～10%的药物透过角膜到达眼内发挥作用，需要增加给药次数来提高生物利用度。而使用眼用制剂时，药物会通过鼻泪管进入鼻腔和消化道最终被全身吸收，所以简单通过增加给药次数来提高生物利用度，容易诱发不良反应和有引发毒性反应的风险。眼膏剂通常以凡士林作为基质制成，油腻感强，使用后视力模糊。眼用凝胶剂是以亲水性聚合物为载体，有较好的生物相容性，为半固体状态，可延长药物的作用时间，减少给药次数，但给药剂量不易控制。 眼用原位凝胶不同于传统的亲水凝胶，它根据体内外不同的生理环境(温度、离子、pH)［24］发生相转化，体外以液体形式存在，滴入眼内立刻转为凝胶。此类剂型有一定新颖性，在贮存期间呈液态，滴入眼内后呈半固体状态，不仅可解决普通滴眼剂眼内滞留时间短、生物利用度不高的问题，也克服了普通眼用凝胶缺乏良好的铺展性、剂量不易控制的问题，具有很大的应用和发展前景。 氢溴酸后马托品为抗胆碱药，具有阻断乙酰胆碱的作用，使瞳孔括约肌和睫状肌麻痹引起散瞳和调节麻痹，比阿托品效力快而弱，散瞳后易恢复，实验过程的观察简单方便。本研究以氢溴酸后马托品作为模型药，对氢溴酸后马托品原位凝胶进行刺激性和药效学研究。 1 材料与方法 1.1 仪器与试药 氢溴酸后马托品原料药(Acros试剂公司)，氢溴酸后马托品滴眼液(自制对照品)，结冷胶（药用级，浙江天伟生化工程公司），丙三醇(分析纯，南京化学试剂一厂)，尼泊金乙酯(广州化学试剂有限公司)，斜视尺（宁波医用缝针厂），裂隙灯显微镜（苏州六六视觉科技股份有限公司）。 1.2 动物 家兔18只，体重（2.0±0.2）kg，无眼疾，东南大学医学院动物实验中心提供。 1.3 方法 1.3.1 氢溴酸后马托品原位凝胶的制备 1.3.1.1 处方 氢溴酸后马托品原料药1.0 g，结冷胶0.5 g，丙三醇2.4 g，尼泊金乙酯0.03 g，加超纯水定容至100 ml。 1.3.1.2 制备 精密称取处方量的结冷胶和尼泊金乙酯溶于约70 ml的超纯水中，在90 ℃下搅拌20 min使其溶解，冷却后加入处方量的氢溴酸后马托品、甘油，搅拌溶解，用超纯水定容至100 ml，然后0.45 μm微孔滤膜过滤即得。另外称取氢溴酸后马托品原料药1.0 g，用超纯水配制成100 ml，即为1%氢溴酸后马托品滴眼液［5］，当作实验阳性对照。 1.3.2 氢溴酸后马托品眼用原位凝胶多次给药对眼刺激性实验［6］ 1.3.2.1 实验方法 取家兔9只，雌雄兼用，试验前24 h内对每只动物的双眼进行检查，选择无眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损伤的家兔，随机分为氢溴酸后马托品眼用原位凝胶组、氢溴酸后马托品滴眼液组和生理盐水组3组。每次于结膜囊内滴入50 μl试液，然后使家兔眼睛被动闭合8～10 s，每日给药两次，连续给药7 d。并于每日给药前及最后一次给药后在裂隙灯显微镜下观察眼的局部反应情况，按眼刺激实验评分标准对角膜、虹膜及结膜分别进行评分，算出平均分值。每只家兔眼刺激反应总积分等于每只家兔眼角膜、虹膜、结膜的刺激反应分值之和。平均分为每次观察时全部家兔眼刺激分值的平均数。然后按眼刺激反应评价标准，判断氢溴酸后马托品原位凝胶的眼刺激性。第7天观察后处死家兔，取出眼球，做角膜病理切片。 1.3.2.2 眼刺激反应评分标准 依照“中华人民共和国卫生部新药研究指导原则汇编”中的眼刺激试验评分标准进行评分。（1）角膜无混浊0分；散在弥漫性混浊，虹膜清晰可见1分；半透明区易分辨，虹膜模糊不清2分；出现灰白色半透明区，虹膜细节不清，瞳孔大小勉强看清3分；角膜不透明，由于混浊，虹膜无法辨认4分。（2）虹膜正常0分；皱褶明显加深，充血、肿胀，角