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海南胆木药材指纹图谱探究 　 作者：李海龙，谭银丰，赖伟永，刘明生，符乃光，张俊清 【摘要】 目的采用高效液相色谱法建立海南胆木药材的指纹图谱,为海南胆木药材的生产提供质量控制方法。方法采用高效液相色谱法, 色谱柱为Diamonsil TM C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长为227 nm；流动相为甲醇-0.10%磷酸水溶液，二元梯度洗脱。结果海南胆木药材指纹图谱中，共有峰相对保留时间与相对峰面积的精密度、重复性和稳定性的RSD均小于3%，符合有关规定。结论所建立指纹图谱可用于海南胆木药材的质量控制。 【关键词】 海南胆木； 高效液相色谱法； 指纹图谱； 质量控制 　　Abstract：ObjectiveTo establish the Fingerprint Chromatography of Hainan Nauclea officinalis by HPLC and provide the method for quality control of Hainan Nauclea officinalis.MethodsAn HPLC method with the Diamonsil TMC18 column(250 mm×4.6 mm，5μm) and a mixture of methanol-0.10% phosphoric acid solution(dual gradient elution) as the mobile phase was used. The dectection wavelength was set at 227nm. ResultsHPLC fingerprint chromatography of 10 batches of samples was established. The results showed that this method had a good repeatability and the 8 common peaks had an exclusive properties. ConclusionThe fingerprint established can be used for quality control of Hainan Naucleae officinalis. 　　Key words：Hainan Naucleae officinalis; HPLC ; Fingerprint; Quality control 　　胆木为茜草科乌檀属乔木乌檀Naudea oftcinalis Pierrc ex Pitard干燥的茎和根, 具有清热解毒，消肿止痛等功效。在我国已用胆木制成注射液及胆木浸膏片，治疗钩端螺旋体和上呼吸道感染［1］。文献报道［2，3］海南胆木中有效成分为生物碱类,其中异长春花苷内酰胺(isovincosidelactone)含量较高。为确保海南胆木药材生产的质量可控，笔者采用高效液相色谱法，建立了海南胆木药材生物碱类成分的检测方法，通过对海南五指山地区不同栽培地区海南胆木药材的研究，建立其稳定可行的指纹图谱。 　　1 仪器与试药 　　Waters 515高效液相色谱仪；国家药典委员会2004年A 版“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”。色谱纯甲醇，试验用水为纯净水，其他试剂均为分析纯。异长春花苷内酰胺对照品（中国药品生物制品检定所，110831-200302）；胆木药材共10批，采自海南五指山地区栽培地不同区域，经中国医科院兴隆分所陈伟平教授鉴定。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件色谱柱为Diamonsil TM C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长为227 nm；柱温为30℃；流动相为甲醇-0.10%磷酸水溶液，二元梯度洗脱，洗脱时间为70 min， 流速为1.0 ml/min；进样量为20 μl，所有组分在70 min内出峰完毕。梯度洗脱条件见表1。 　　2.2 溶液制备 　　2.2.1 对照品溶液制备精密称取异长春花苷内酰胺对照品适量，置于10 ml容量瓶中，加甲醇溶液适量溶解，并定容至刻度，配制成质量浓度大约为160 μg/ml的对照品溶液。表1 梯度洗脱条件（略） 　　2.2.2 供试品溶液制备取胆木药材0.5 g，精密称定，置100 ml具塞锥形瓶中，加入70%乙醇50 ml，称重，于沸水浴中加热回流40 min，放冷，称重，用70%乙醇补足减失的质量，滤过，取续滤液适量，以0.45 μm 微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。 　　2.3 方法学考察 　　2.3.1 精密度实验取同一份供试品溶液，连续进样6次，记录其图谱。计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值的RSD。 结果