白背三七多糖提取纯化及含量测定.docVIP

白背三七多糖提取纯化及含量测定 　作者：姜曼花 邱细敏 刘胜姿 彭胜 黎强 【摘要】 　　目的确定白背三七多糖的最佳提取方案，对其多糖进行分离纯化和含量测定。方法建立正交实验，对其提取方案进行优化；通过Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀以及DEAE－52柱层析进行分离纯化；蒽酮-硫酸法测定其总多糖含量。结果温度90℃，固料比1:9，提取时间2 h；提取次数2次，所得多糖的含量最高。蒽酮-硫酸法测得粗多糖含量为1.49%；DEAE－52柱层析分离纯化分别得到组分Ⅰ、组分Ⅱ、组分Ⅲ。结论水提白背三七多糖工艺简便，投资少，有利实现工业化大生产。 【关键词】 白背三七 多糖 蒽酮-硫酸法 　　Abstract：ObjectiveTo fix an optical extractive method and to make separation，purification and content determination of polysaccharide in Gynuradivaricata(L.)DC. MethodsOrthogonal experiment was introduced to study the optimum extraction process of Gynuradivaricata(L.)DC. polysaccharide (GDPS）. The polysaccharide was purified using sevage deprotein and DEAE-52 column chromatography.To make content determination with the method of anthranone-sulphuric acid.ResultsThe optimal extracting conditions were:extracting temperature 90℃， the ratio of solid and liquid 1:9； extracting time 2h and extracting twice;the content percentage of rude polysaccharide was 1.49%. GDPSⅠ、Ⅱ、Ⅲ were obtained through DEAE-52 column chromatography.ConclusionIt’s simple, costless to extract polysaccharide with water-boiling method. 　　Key words：Gynura divaricata(L.)DC.; Polysaccharide; Extraction and purification; Content determination 　　白背三七Gynuradivaricata(L.)DC.为菊科三七草属植物，又名白(百)子菜，分布于台湾至华南、西南一带，喜生于潮湿的阴地上［1］，根、茎、叶均可入药，其根及根茎味甘，性凉，有清热、凉血、散淤消肿之功效，用于咳嗽痰喘、肺痈、崩漏、烫伤、跌打损伤、刀伤出血等症；而茎叶味咸，微辛，性凉，有消热，舒筋及止血，祛淤的作用，用于镇咳、风湿性关节痛、骨折、创伤出血、痈肿疮疥等症。在民间则作为一种保健野菜，由于其能促进人体新陈代谢，增强体力，滋补强身，延年益寿而备受青睐。湖南岳阳地区众多糖尿病患者长期食用，有效控制了血糖升高，因不知植物名而被患者称为“救命草”。网上则称其为“神奇的植物”，也有称其为“明日叶”或“明日草”等。药理学研究表明，多糖(polysaccharide) 是构成生命的四大基本物质之一，多糖在增强免疫力［2］、降血糖、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗衰老、抗凝血等方面发挥着生物活性作用。因此对多糖的研究与开发已越来越引起人们的广泛关注。关于白背三七栽培技术文献报道较多［3］，化学活性成分仅见该植物吡咯啶生物碱［4］、黄酮类成分［5，6］及脂肪酸成分分析［7，8］的报道，尚未见其多糖的研究报道。本文报道白背三七多糖的提取纯化及含量测定。 　　1 器材 　　1.1 仪器UV-2501 PC紫外分光光度计，DEAE-52层析柱 　　1.2 药材与试剂无水乙醇、浓硫酸、蒽酮、氯仿、正丁醇（均为分析纯）、葡萄糖标准品（国药集团化学试剂有限公司）、白背三七药材（岳阳市场上购买）。 　　2 方法 　　2.1 白背三七多糖的提取 　　2.1.1 提取温度的确定 取已干燥的药材15 g，按药材：石油醚＝1:3进行脱脂，脱脂后的药材按1：7的比例，以水为溶剂，分别在不同的温度下提取2次，提取2 h/次。 　　2.1.2 提取时间的确定取已干燥的药材