白背叶提取物WF对2215细胞分泌HBsAg及HBeAg影响.doc

白背叶提取物WF对2215细胞分泌HBsAg及HBeAg影响 　【摘要】 目的研究白背叶提取物WF对乙肝病毒的抑制作用。方法接种2215细胞24 h后，加入不同浓度的白背叶提取物WF培养8 d，以细胞形态学的变化为指标评价WF对2215细胞的毒性。收集最大无毒浓度下的培养液，酶联免疫法(ELISA)检测培养液中HBsAg和HBeAg水平。结果在最大无毒浓度下，WF对2215细胞HBsAg和HBeAg的分泌有明显抑制作用。WF抑制HBsAg的半数有效量(IC50)为8.61 μg/ml;抑制HBeAg的IC50为20.87 μg/ml。结论WF可明显抑制2215细胞HBsAg和HBeAg的分泌，具有显著的抗乙肝病毒作用。 【关键词】 白背叶提取物; 2215细胞; HBsAg; HBeAg 　　Abstract：ObjectiveTo study the anti-HBV effect of WF.Methods2215 cells were cultured for 24 h, then different concentration of WF were added and cultured for 8 d, and the WF’s toxicity was evaluated according to the morphological alteration of 2215 cells. The supernate of culture was collected at the non-toxic concentration of WF, enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) was used to determine the HBsAg and the HBeAg levels in the supernate. ResultsThe non-toxic concentration of WF inhibited HBsAg and HBeAg secretion of 2215 cells significantly (Plt;0.01), and the 50% inhibiting concentration (IC50) of WF on HBsAg secretion was 8.61 μg/ml, while the IC50 on HBeAg secretion was 20.87 μg/ml. ConclusionWF can inhibit HBsAg and HBeAg secretion of 2215 cells effectively, indicating that WF may have anti-HBV activity. 　　Key words：Whitebackleaf extractants; 2215 cell; HBsAg; HBeAg 　　白背叶为大戟科植物Mallotus apelta (Lour.) MuelL.-Arg.，具有清热利湿、解毒止血、止痛之功，常用于治疗肠炎腹泻、慢性肝炎、脾脏肿大及跌打损伤等[1]。有研究发现，白背叶根水煎液对体外培养的2215细胞有显著的抗肝炎病毒作用[2]，且该作用在鸭乙肝病毒实验研究中亦得到证实[3]。此外白背叶还具有较好的抗肝纤维化和抗肝损伤作用[4，5]。本研究采用白背叶中提取出的有效成分群WF，评价其对2215细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响，进一步探讨白背叶提取物WF的抗乙肝病毒作用。 　　1 材料与仪器 　　1.1 药物WF为棕褐色粉末结晶，由广西中医学院中药化学教研室提供。 　　1.2 试剂 Eagles MEM干粉(美国GIBCO公司产品);胎牛血清(美国Hyclone Lab公司产品);G-418(Genticin 产品);L-谷氨酰胺(Amresco分装);卡那霉素(Amresco分装); DMSO(博大泰克公司产品);0.25%胰蛋白酶(美国Hyclone Lab公司产品);乙肝表面抗原测试盒(上海荣盛生物技术有限公司，批号;乙肝e抗原测试盒(上海荣盛生物技术有限公司，批号。 　　1.3 仪器DLF560型超净工作台(荷兰clear Air Techniek bv公司产品);311二氧化碳培养箱(美国ThermoForma公司产品);倒置显微镜(德国LEICA BMIRB产品);酶标仪(奥地利SUNRISE产品);培养瓶(加拿大BIOFIL 公司产品);96孔板(美国Corning公司产品);微量移液器(法国Gilson公司产品);十万分之一电子天平(美国赛多利斯仪器系统有限公司产品)。 　　1.4 2215细胞2215细胞由