百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET及TNF-α含量及茎叶人参.docVIP

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百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET及TNF-α含量及茎叶人参

百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET及TNF-α含量及茎叶人参  【摘要】 目的探讨百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET和TNF-α的含量及茎叶人参皂苷的干预作用。方法采用百草枯染毒急性肺损伤大鼠模型,随机分为正常对照组(NS组)、模型组(ALI组)、皂苷组(GS组)。观察茎叶人参皂苷对百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET和TNF-α的含量的影响。结果ALI组肺组织NO含量和NOS活性明显升高,与NS组比较有统计学意义(Plt;0.05);与ALI组比较,GS组肺组织NO含量和NOS活性降低(Plt;0.05,Plt;0.01)。ALI组肺组织ET含量高于NS组(Plt;0.01),而GS组肺组织中ET含量低于ALI组(Plt;0.05)。ALI组肺组织TNF-α的含量高于NS组(Plt;0.05);GS组肺组织中TNF-α低于ALI组(Plt;0.05)。结论茎叶人参皂苷可以减少TNF-α因子的释放,抑制NO、ET的升高,从而保护细胞免受低氧损伤,减轻肺血管收缩程度和炎症反应。 【关键词】 急性肺损伤; 茎叶人参皂苷; 百草枯; 内皮素; 肿瘤坏死因子-α 炎症反应的失衡是急性肺损伤(ALI)的本质原因,表现为促炎反应抗炎反应的失衡。其特征为,由肺间质急性炎症反应而导致的肺内皮和上皮细胞屏障损伤,而炎性因子作为重要的信号因子,启动、放大和延续全身或局部的炎症反应。TNF-α是最重要的前炎性因子之一。有报道称NO和ET参与了ALI的病理生理过程[1],本研究通过百草枯(PQ)诱导的ALI模型,观察肺组织NO、ET及TNF-α的含量,探讨NO、ET及TNF-α参与ALI的作用机制及茎叶人参皂苷的干预作用。   1 材料   清洁级健康Sprague Dawley(SD)大鼠45只,体质量(300±40)g,由河南省实验动物中心提供〔实验动物生产许可证号:SCXK(豫)2008-0017;实验动物使用许可证号:SYXK(豫)2008-0105〕。茎叶人参皂苷粉剂(stems and leaves Ginsenoside)由辽宁大自然生物科技公司提供; TNF-α放射免疫药盒由上海赛百胜生物工程公司提供;20%百草枯浓缩液由上海先正达农药有限公司生产;NO 、NOS及ET测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。   2 方法   2.1 分组及模型的建立将45只SD雄性大鼠,随机分为肺损伤组(ALI组)、皂苷组(GS组)和正常对照组(NS组)。皂苷组提前3 d给药,给予腹腔注射皂苷50 mg/kg,1次/d,连用3 d。3 d后,肺损伤组及皂苷组均一次性灌胃80 mg/kg百草枯,正常对照组只给等量的生理盐水。   2.2 观察指标在造模72 h后分批处死各组实验动物,腹主动脉取血(1∶500u肝素抗凝)行血气分析,腹主动脉放血处死大鼠;取大鼠左下肺组织计算肺系数;取左上肺进行TNF-α,ET ,NO及NOS含量的测定;取右肺组织肉眼观察和病理HE染色200倍光镜下观察。   2.3 统计学方法计量资料数据以±s表示。不同时间点的比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)进行组间比较,以最小显著差异法(LSD法)进行不同组别之间的两两比较。采用SPSS10.0统计软件进行数据处理。Plt;0.05为差异有统计学意义。   3 结果   3.1 肺损伤指标模型组PaO2明显低于对照组(P﹤0.05),肺系数明显高于对照组(P﹤0.05);皂苷组PaO2较模型组有所增加(P﹤0.05),而肺系数也较模型组减低(P﹤0.05)。结果见表1。表1 茎叶人参皂苷溶液对PQ致ALI大鼠PaO2及肺系数的影响与NS组比较,★Plt;0.05; 与ALI组比较,△Plt;0.05;n=15   3.2 肺病理   3.2.1 肺外观及变化   NS组:大鼠肺组织表面光滑,呈淡粉红色,无充血水肿及梗死灶,触之弹性较好。   ALI组:肺肿大,边缘钝,严重肺淤血、水肿,部分肺有弥漫性出血,胸腔内有血性液体,部分肺组织呈暗红色,质地中等;肝样变,表面及肺切面处可见有团块状白色坏死物质,部分中毒大鼠胸腔有渗出液。   GS组:肺淤血水肿明显,部分标本也有弥漫性出血,但较ALI组出血区域和损伤程度减轻。    3.2.2 肺光镜下观察NS组光镜下观察可见肺泡结构清晰,肺泡壁薄,肺泡隔无增宽及充血,无炎性细胞浸润及出血现象,可见少许纤维组织。ALI组的病理改变,主要为肺泡壁毛细血管充血,肺泡壁增厚,局灶性炎症细胞浸润,甚至出血,部分肺泡腔充满粉染均质水肿液,部分有透明膜形成,肺泡腔内有游离的中性粒细胞和巨噬细胞。GS组的病理改变显示:肺泡壁毛细血管充血、出血均较ALI组有减轻。结果见图1~3。   3.3 肺组织NO和NOS的含量AL

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