睾丸扭转对大鼠生精能力影响及维拉帕米保护作用.docVIP

睾丸扭转对大鼠生精能力影响及维拉帕米保护作用 　【摘要】 目的:探讨钙离子通道拮抗剂(维拉帕米,verapamil)对大鼠睾丸扭转复位后睾丸细胞损伤的保护作用。方法:选用出生1个月左右的健康雄性ＳＤ大鼠30只,随机平均分成3组，手术制作幼鼠睾丸扭转模型（720°,2h）。对部分扭转组应用生理盐水或钙离子通道拮抗剂(维拉帕米)。术后6个月处死,取两侧睾丸标本，测定睾丸NO含量、NOS活性，并制备细胞悬液，检测记录每样本中单倍体细胞占细胞总数百分比。结果:B组（扭转组）单倍体细胞占细胞总数明显下降，而且睾丸组织NO含量、NOS活性升高，维拉帕米可减轻上述变化。结论:维拉帕米可以提高睾丸组织单倍体细胞的百分比，在一定程度上可以减轻睾丸组织损伤，对睾丸的生精能力有明显的保护作用。 【关键词】 睾丸扭转;维拉帕米;流式细胞术;一氧化氮 【ABSTRACT】 Objective:To investigate the protective effect of verapamil on the testis after testicular torsion in rats. Methods: 30 healthy male SpragueDanley rats(onemonthold) were randomly divided equally into three groups. A model of testicular torsion (720 degree, 2hours) were created. Normal saline or Ca2+ channal blocker(verapamil) were administrated in the intervention groups. Six months laters, nitric oxide (NO), nitric oxide synthase activity (NOS) were measured in both testis of the rats. And the DNA content were measured by flow cytometry, the percentage of monoploid were recorded.Results: After torsion NO and NOS activity increased greatly in both side, and showed obviously more in the torsive side; The percentage of monoploid significantly decreased in the B group(testicular torsion) ,verapamil could reduce the extent of these changes. Conclusion: The verapamil could raise the percentage of monoploid in testis and reduce the extent of damages. 【KEY WORDS】 Testicular torsion; Verapamil; Flow cytometry; Nitric oxide 睾丸扭转是一种泌尿外科的急症,好发于青春期前后的儿童。动物实验及临床研究表明,急性睾丸扭转,即使没有睾丸组织的梗死出现,缺血后的睾丸血供恢复到正常水平,仍可出现睾丸生精功能的损害,生育能力的减低[1]。我们通过建立大鼠睾丸扭转模型,测定NO含量、NOS活性，用流式细胞技术检测睾丸内各种细胞的DNA含量,以此了解其生成精子的数量变化及钙离子通道拮抗剂(维拉帕米)对减轻睾丸细胞损伤的作用。 1 材料与方法 1.1 动物模型建立与分组 选用出生1个月左右SD雄性健康大鼠(体重180～200ｇ)30只，分为实验组（22只）和对照组（8只），2%戊巴比妥钠（50mg/kg）腹腔注射麻醉。按下列要求实验： A组(对照组)：8只大鼠，左侧阴囊切开,游离暴露睾丸,依扭转模型随意搬动,但不予扭转,阴囊缝合关闭。 B组（扭转组）：11只大鼠，左侧阴囊切开,绕精索顺时针扭转睾丸720°,肉膜白膜缝合固定防止自发复位,阴囊缝合。2ｈ后,第二次切开左侧阴囊,将扭转的睾丸复位固定,缝合阴囊。 C组（维拉帕米组）：11只大鼠，方法同B组,复位前30min尾静脉缓慢注入维拉帕米注射液（1mg/kg）。 1.2 标本处理 1.2.1 睾丸匀浆的制备 所有动物模型按组分笼饲养,术后6个月处死,采取两侧睾丸标本。经事先称量,各组动物身长、体重差异无显著性意义。剔净睾丸