砒霜纳米乳治疗小鼠Lewis肺癌效果初步评价.doc

砒霜纳米乳治疗小鼠Lewis肺癌效果初步评价 　作者：许严伟 ，杜钢军，林海红，宋紫辉，张硕，王梅 【摘要】 　　目的评价砒霜纳米乳治疗小鼠Lewis肺癌的效果及对免疫系统的毒性。 方法采用MTT法及流式细胞仪分别检测A549细胞的增殖和凋亡；采用小鼠Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型观察砒霜的抗肿瘤作用，通过小鼠碳粒廓清和迟发性变态反应考察砒霜对免疫系统的毒性。结果砒霜纳米乳可诱导A549细胞的凋亡，流式结果出现DNA亚二倍体凋亡峰；砒霜纳米乳与其水溶液连续灌胃给药8 d对小鼠Lewis肺癌皮下肿瘤的抑瘤率分别为42.0%和33.2%，砒霜水溶液对小鼠碳粒廓清能力及迟发性变态反应均有降低作用，但其纳米乳对两者均无明显影响。结论砒霜纳米乳对小鼠Lewis肺癌皮下肿瘤的效果优于其等剂量水溶液，且能降低对机体免疫系统的损害。 【关键词】 砒霜纳米乳 Lewis肺癌 免疫 　　Abstract:Objective To evaluate the therapeutic action of arsenic nano-emulsion on Lewis lung cancer and its toxicity to immunity .MethodsThe proliferation and cell cycle of A549 cells were determined by MTT assay and flow cytometry respectively. The antitumor of arsenic was tested by tumor injected subcutaneously in mice and its toxicity to immunity was examined by clearance rate of charcoal particles and delayed type hypersensitivity.ResultsArsenic nano-emulsion and its water solution taken orally for eight days had respectively 42.0% and 33.2% inhibition on lewis lung cancer. The clearance rate of charcoal particles and delayed type hypersensitivity were depressed by arsenic water solution but not by arsenic nano-emulsion in mice. ConclusionArsenic nano-emulsion has better therapeutic action on Lewis lung cancer than arsenic water solution does at the same dose, and it also reduces toxicity to immunity. 　　Key words:Arsenic nanoemulsion； Lewis lung cancer；Immunity 　　肿瘤在人类死亡的主要疾病中居第2位，近年来发病率呈逐年上升趋势［1］。尽管目前已有多种治疗肿瘤的方法问世，由于肿瘤早期不易被发现的特点，化疗在肿瘤的治疗中一直处于主导地位。但因目前化疗药物对肿瘤的杀伤缺乏选择性，在杀死肿瘤细胞的同时对机体的正常细胞也产生较大毒性，临床上往往因病人不能耐受化疗药物的毒性最终导致肿瘤治疗失败［2］。中药砒霜在祖国医学中曾被用于治疗恶性肿瘤等多种疾病，但由于它是一种剧毒物质，其药用价值一直被其毒副作用所掩盖。自1996年《Science》杂志报道［3］的三氧化二砷（As2O3）成功治愈急性早幼粒细胞性白血病(APL)的成果以来，对As2O3药理作用的探索引起了世界医学界的重视，在我国对砒霜的研究也成为开发抗肿瘤药物的热点之一［4］。我们将砒霜制成纳米乳剂，以发病率较高的肺癌为肿瘤对象，研究砒霜的抗肿瘤作用及其对免疫功能的损害，以期探索更好利用砒霜的新途径。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物C57B/6小鼠，雌性，18～22 g，购自北京维通利华实验动物有限公司；昆明种小鼠，雌性 18～22 g，购自河南省实验动物中心。 　　1.2 瘤株Lewis肺癌细胞，购于上海细胞所，本实验室C57BL/6小鼠传代保存；A549细胞，中国科学院生物物理研究所惠赠，用含10%胎牛血清和青霉素、链霉素各100 U/ml的RPMI-1640在37℃， 5%CO2 恒温培养箱中培养,实验时选用对数生长期的细胞。 　　1.3