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硫辛酸对细胞DNA损伤保护作用初步探究 　作者：陈宏莉，海春旭，梁欣，张晓迪，刘瑞 【关键词】 过氧化氢 Preliminary investigation on protective function of lipoic acid from DNA damage 　　【Abstract】 AIM: To the study doseeffect relationship between the DNA damage of HepG2 cells and the effect of different concentrations of hydrogen peroxide (H2O2) for 2 h respectively, and to observe the protective function of lipoic acid from the DNA damage of cells at the same time. METHODS: HepG2 cells were divided into control group, damage group and protective group, then were added with different concentrations of H2O2 and lipoic acid. Two hours later, the single cell gel electrophoresis (SCGE) was used to detect the DNA damage. RESULTS: The DNA damage of cells was more serious with H2O2 concentration increasing. The tail length, the tail DNA content and the tail moment significantly increased (Plt;0.05）. Lipoic acid could significantly decrease the tail length, the tail DNA content and the tail moment of damaged cells （Plt;0.05）. CONCLUSION: H2O2 causes DNA damage of cells in a doseeffect manner, while lipoic acid can reduce effectively this DNA damage caused by H2O2. 　　【Keywords】 hydrogen peroxide; DNA; comet assay; thioctic acid 　　【摘要】 目的： 用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）研究不同浓度过氧化氢（H2O2）分别作用于HepG2细胞2 h后DNA损伤的剂量效应关系，同时观察硫辛酸对H2O2损伤细胞DNA的保护作用. 方法： 将细胞分为对照组、损伤组和保护组，依次加入不同浓度的H2O2及硫辛酸，应用SCGE检测H2O2引起细胞DNA损伤. 结果： 随着H2O2浓度的增加，细胞DNA的损伤程度加重，能使尾长、尾部DNA百分含量和尾距显著增加（Plt;0.05）. 硫辛酸能使H2O2损伤细胞的尾长、尾部DNA百分含量和尾距均较对照组减少（Plt;0.05）. 结论： H2O2对细胞DNA损伤具有剂量效应关系，硫辛酸可以有效地减少H2O2引起的细胞DNA的断裂损伤. 　　【关键词】 过氧化氢；DNA；慧星试验；硫辛酸 　　0引言 　　体内自由基代谢异常可以导致细胞DNA损伤，过氧化氢(H2O2)是自由基代谢过程中的一个重要中间产物，在引起细胞DNA损伤过程中具有重要作用. 硫辛酸作为一种有效的抗氧化剂，能抑制自由基对细胞的损伤［1］. 本研究利用可以快速、灵敏检测出细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳技术（SCGE）来研究不同浓度H2O2分别作用于HepG2细胞2 h后DNA损伤的剂量效应关系，同时观察硫辛酸对H2O2损伤DNA的保护作用，从而为探讨细胞DNA损伤的机理提供直接证据，并筛选出有效的抗细胞DNA损伤的抗氧化剂. 　　1材料和方法 　　1.1材料HepG2细胞系（本校病理学教研室惠赠），正常熔点琼脂糖、低熔点琼脂糖、溴化乙锭(Sigma公司），其他试剂均为进口或国产分析纯试剂. 　　1.2方法将肝癌细胞株HepG2接种于12孔培养板中，分为对照组、损伤组和保护组3组，当细胞长至80%~90%融合时（约24 h）损伤组分别加入H2O2，使其终浓度为0, 10, 100, 500, 1000, 2000 μmol/L