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缬草油体外抑菌活性探究
缬草油体外抑菌活性探究
【摘要】 目的探讨缬草油的抑菌活性。方法以索氏提取法和水蒸气蒸馏法提取的缬草油为试材,用管碟法和微量稀释法比较两种方法提取的缬草油对供试菌的抑菌活性、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果两种方法提取的缬草油对细菌和真菌有一定程度的抑制作用。结论缬草油有抑菌作用,具很大应用潜力。实验结果为其在食品、化妆品行业的开发应用提供了依据。
【关键词】 缬草;挥发油;抑菌活性
Abstract:To investigate the inhibitory effects of the volatile oil from Valeriana officinalis L. Volatile oil was extracted from Valeriana officinalis L. by water steam distillation or Soxhlet method. Inhibition zone ,minimum inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) were examined by using plate spread and micro dilution method . The results indicated that the Valeriana officinalis L. volatile oils showed considerable antimicrobial activity to tested bacteria and fungi . And the higher the concentration of the volatile oil is,the better the antimicrobial effect is.
Key words:Valeriana of ficinalis L. ; Volatile oil; Antimicrobial activity
缬草Valeriana officinalis L.是一种败酱科、缬草属多年生草本植物[1]。缬草原产于亚洲,在北美、欧洲、日本和我国的湖南、云南、贵州、四川等省有广泛的分布。缬草的根和根茎具有很高的经济价值和药用价值[2],我国民间很早就用于治痢疾、驱蛔虫、降血压、解痉挛等。从缬草根中提取的挥发油对神经衰弱、失眠、癫痫等有明显疗效[3]。同时缬草油还是名贵的天然香料,特别适用于配制高档烟的加香和食品的定香剂。许多植物挥发油由于其特殊的化学组成,在很多研究中表现出了很好的抗菌活性,成为新的高效低毒防腐剂的重要来源[4]。目前尚未有对缬草油体外抗菌作用的详细报道,本实验以水蒸气蒸馏法和索氏提取法提取缬草油为试材,进行体外抗菌作用研究,旨在拓宽缬草资源的应用范围,以期为进一步开发利用这一丰富的植物资源提供参考数据。
1 材料与仪器
1. 1 原料缬草,采于湖南省湘西自治州(经鉴定为宽叶缬草V.officinalis L.var.latifolia Miq.)
1.2 菌种枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus,大肠杆菌Escherichia coli,黑曲霉Aspergillus niger,青霉Penicillium citrinum, 根霉Rhizopus spl.。以上菌种均由中南林业科技大学发酵工程实验室提供。
1.3 培养基牛肉膏蛋白胨培养基(细菌用) ;马铃薯葡萄糖琼脂( PDA)培养基(真菌用) 121℃高压灭菌20 min,备用。
1.4 器材牛津杯,LAC-5060S高压灭菌锅,PYX-280S-A生化培养箱,HWY-100B恒温培养摇床,RE-52A旋转蒸发器,SHZ-D循环水式真空泵,SCW-CJ-2FD超净工作台。
2 方法
2. 1 挥发油的提取水蒸气蒸馏法[5]:取缬草50 g ,置于1 000 ml圆底烧瓶中,加入适量的蒸馏水使其润湿,水蒸气蒸馏4 h ,收集水-缬草油馏出液,将馏出液用乙醚萃取,乙醚相加适量无水硫酸钠脱水后,于40℃左右蒸干乙醚,收集挥发油。索氏提取法[6]:取缬草25 g ,用滤纸包成小包放入索氏提取器中,提取瓶内加入乙醚200 ml,然后固定在铁架台上,置于恒温水浴锅中(40~45 ℃) ,同时冷凝水回流,提取至提取器中液体无色,取出提取液,加无水硫酸钠低温干燥24 h 过滤,旋转蒸发挥去滤液中的乙醚,收集挥发油。
2. 2 体外抗菌试验
2.2.1 菌液制备
将保存菌种接种平板,于37 ℃培养24 h后,挑选典型菌落接
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