罗布麻叶顶空气相色谱—质谱指纹图谱探究.docVIP

罗布麻叶顶空气相色谱—质谱指纹图谱探究 　 作者：相淞华,宋建平,刘训红,张月婵 【摘要】 　　【目的】建立罗布麻叶挥发性成分顶空气相色谱—质谱（HSGCMS）指纹图谱分析方法,评价不同产地罗布麻叶药材的质量。【方法】采用HSGCMS联用技术对不同产地罗布麻叶的挥发性成分进行分析,测定其指纹图谱,确定共有指纹峰,并作模糊聚类分析和相似度评价。【结果】罗布麻叶挥发性成分中含有14个特征性指标成分,初步建立了以此14个共有峰为特征指纹信息的HSGCMS指纹图谱。【结论】本方法准确可靠,重复性好,可作为罗布麻叶质量评价的依据。 【关键词】 罗布麻叶/化学；挥发性成分/分析；指纹图谱 　　罗布麻叶为《中国药典》收载的常用中药,系夹竹桃科植物罗布麻Apocynum venetom L.的干燥叶,具有平肝安神、清热利水之功效［1］。现代用于治疗高血压、高血脂、冠心病、哮喘、气管炎等疾病有较好的效果［2］。罗布麻叶挥发性成分为主要活性成分之一,如芳樟醇有镇静、降血压、抗菌等作用［3］,薄荷酮和胡薄荷酮有解热、镇痛、抗炎作用［4］,藏红花醛有较强的抗癌活性［5］,氧化石竹烯有平喘、镇静、抗癌作用,1α萜品醇有显著平喘功效［6］,但尚未见有关罗布麻叶挥发油指纹图谱研究的报道。本研究采用顶空气相色谱—质谱（HSGCMS）联用技术对不同产地罗布麻叶的挥发性成分进行分析，现报道如下。 　　1仪器与试药 　　Agilent 6890/5975B型气—质联用分析仪,G1701DAD.03.00.611工作站,Agilent G1888顶空自动进样器(美国安捷伦仪器公司),NIST05标准质谱检索库。 　　罗布麻叶各产地样品为实地采集或由当地药材公司提供,编号为：S1江西,S2安徽,S3吉林,S4山东,S5山西,S6江苏,S7新疆,S8河北,S9内蒙古,S10天津,S11辽宁,S12陕西。均经研究者鉴定为夹竹桃科植物罗布麻Apocynum venetom L.的叶。留样凭证存放于南京中医药大学中药鉴定实验室。 　　2方法与结果 　　2.1分析条件 　　2.1.1色谱条件色谱柱：HP5MS(涂布浓度为5%的苯甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱,30.0 m×250 μm×0.25 μm)；进样口温度：180℃；程序升温：50℃保持20 min,以4℃/min的速率升至200℃,保持5 min；载气：He气,流量：1.0 mL/min,分流比15∶1。 　　2.1.2质谱条件电离方式：电子轰击离子源(EI)；离子源温度：230℃,四级杆温度：150℃,接口温度：280℃；电子倍增器电压：1 329.4 V；电子能量:70 eV；扫描范围：45.0~650.0 aum。 　　2.2顶空供试品制备 　　通过对药材粉碎粒度、体积装样量、顶空加热温度及顶空加热时间进行考察,确定罗布麻叶挥发性成分优化的顶空条件：取罗布麻叶粉末(过40目筛)3 g,精密称定,置顶空瓶中,密封,放入顶空进样器,120℃加热平衡30 min,供测试。 　　2.3方法学考察 　　2.3.12 h记录图取罗布麻叶挥发性成分进样分析,结果表明：60～120 min无出峰,提示50 min内挥发性成分出峰完全。 　　2.3.2精密度试验取罗布麻叶(S2)挥发性成分进行分析,连续进样5次。结果表明：14个指标成分群保留时间的相对标准偏差均小于0.21%,相对含量的相对标准偏差均小于5%,提示仪器精密度良好。 　　 　　2.3.3稳定性试验取罗布麻叶(S2)挥发性成分进行分析,分别在1、3、6、24、48、120 h进样6次,得14个主要特征峰保留时间、相对含量。结果表明：14个指标成分群保留时间相对标准偏差均小于0.29%,相对含量的相对标准偏差均小于5%,提示120 h内样品(溶液)稳定性较好。 　　2.3.4重复性试验取同一批次罗布麻叶(S2)5份,提取挥发性成分后分别进样分析,得14个主要特征峰的保留时间和相对含量。结果表明：14个指标成分群保留时间的相对标准偏差为0%～1.37%,相对含量的相对标准偏差为1.83%～5.15%,说明重复性较好。 　　2.4指纹图谱建立 　　样品按选定的顶空条件及分析条件进行分析,测得所有供试品的气相色谱—质谱（GCMS）总离子流图；再对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得质谱图,所有组分质谱数据经计算机处理和NIST05标准质谱图库检索鉴定,并与有关标准谱图核对,初步确定出罗布麻叶挥发性成分中53种化合物。根据罗布麻叶挥发性成分HSGCMS总离子流图所给出的峰数高、峰保留时间和峰面积值等相关参数以及成分鉴定结果,