胃乐煎对HP感染模型大鼠胃病理组织影响.docVIP

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胃乐煎对HP感染模型大鼠胃病理组织影响

胃乐煎对HP感染模型大鼠胃病理组织影响  胃乐煎对HP感染模型大鼠胃病理组织的影响 胃乐煎论文联盟是国家级名老中医陆拯主任中医师多年从事脾胃病的经验方基础上增加蜂胶研制成,对胃脘痛、胃痞等具有显著疗效。现代药理学研究证明,蜂胶具有免疫增强作用、抗氧化作用、抗溃疡作用和抗菌消炎作用[1]。因此我们用该方对HP感染模型大鼠进行实验观察,为临床上胃乐煎治疗HP感染提供实验依据。  1实验材料  1.1实验药物胃乐煎片:棕色颗粒,主要由蜂胶、鸡矢藤、吴茱萸、炒白术、黄连、枳壳等组成,每片重量0.47g,含2.107g生药,临床用量为每人12片/日,60片/瓶,批号:100401,每片含黄连(以盐酸小檗碱C20H17NO4·HCl计)为3.86mg,含枳壳(以柚皮苷C27H32O14)为9.02mg,由上海交大穗轮药业有限公司提供(我院委托加工),使用时用蒸馏水配成所需浓度;养胃舒冲剂:为棕黄色至棕色的颗粒,味酸、甜,由党参、白术、黄精等组成,10gtimes;6袋,批号:0902206,合肥神鹿双鹤药业有限公司生产;丽珠维三联:由枸橼酸铋钾片、替硝唑片、克拉霉素片组成,批号090502,由丽珠集团丽珠制药厂生产。  1.2实验试剂哥伦比亚血琼脂基础:Oxoid公司产,批号 CM0331,规格:500g/瓶,购买于北京赛默飞世尔生物化学制品有限公司。无菌脱纤维羊血:购买于北京兰伯瑞生物技术有限责任公司生产,批号 091130,规格:100mL/瓶;去氧胆酸钠(Deoxycholicacid Sodiusalt):500g/瓶,上海蓝季生物公司购买。  1.3实验仪器HR40-IIA2生物安全柜、XQ-280SD高压灭菌器、TGL-168离心机、YQX-II型厌氧培养箱、CM1850 LEiCA病理切片机、BM-VI生物组织冷冻包埋机、T S-12F生物组织自动脱水机、2.0 M PLXEL病理图像分析系统。  1.4实验动物幼龄Wistar大鼠,雌雄兼备,体重80~100g,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,许可证号码:SCXK(沪)2007-0005,动物合格证号:2007000505169,饲养于浙江省中医药研究院动物中心,许可证号:SYXK(浙2009-0122)。  1.5HP菌SS1株( Sydney Strain 1)中国疾病预防控制中心赠送,接种在含10%羊血及幽门螺杆菌选择性添加剂(含万古霉素10mu;g/mL、头孢磺啶5mu;g/mL、甲氧苄啶5mu;g/mL、两性霉素B 5mu;g/mL)的哥伦比亚血琼脂培养基上,37℃、微需氧条件下( 5% O2、10% CO2、85% N2) 培养。  1.6统计学处理数据均以plusmn;s表示,经单因素方差分析后采用ANOVA t检验进行统计分析。  2实验方法  2.1大鼠经口幽门螺杆菌(HP)感染模型取80~100g的幼龄Wistar大鼠,雌雄各半,按去氧胆酸钠法造模慢性胃炎法[2],用20mmol/L去氧胆酸钠和60%乙醇联合刺激,连续3周,再灌胃丽珠维三联(0.20g/kg)1周,清除大鼠胃內杂菌,禁食12~14h,灌胃5%NaHCO32mL,5min后灌胃从培养基上冲洗下的HP菌液1.5mL(108~1010cfu),30min后给食,每周感染2次,共8次。 论文代写  2.2实验方案取84只上述方法造模后大鼠,随机分为6组,每组14只,雌雄各半,分别为胃乐煎高剂量组(10.60g生药/kg)、中剂量组(5.30g生药/kg)、低剂量组(2.65g生药/kg)、养胃舒对照组(4.0g/kg)、丽珠维三联对照组(0.20g/kg)及模型对照组(生理盐水10mL/kg),另取14只正常大鼠作为正常空白对照组(未造模)。丽珠维三联阳性组给药1周,其它各组分别给相应药物6周,并停药4周。实验结束时,7组大鼠均禁食12h,脱颈椎处死大鼠,取胃用无菌生理盐水洗去胃内容物,用福尔马林固定,常规制作病理切片,观察胃黏膜炎症情况、胃黏膜腺体厚度、胃腺体数目、壁细胞、主细胞数目等指标。炎症情况按炎症细胞浸润的程度分为0~3七个级别,0级:无炎症;0.5级:镜下观察炎症介于0与1之间;1级:在胃小凹区或固有腺底部可见多个慢性炎细胞浸润;1.5级:镜下观察炎症介于1与2之间;2级:在胃黏膜小凹至黏膜肌层均有较多炎细胞浸润;2.5级:镜下观察炎症介于2与3之间;3级:胃黏膜内可见成堆炎细胞聚集灶。  3实验结果  3.1胃乐煎对HP模型大鼠体重的影响结果见表1~2、插页Ⅳ图1。由表1~2及插页Ⅳ图1可见,HP模型大鼠的体重较正常组有明显下降(P<0.05~0.001),给胃乐煎后大鼠体重较模型大鼠有明显增高,给药6周后尤其明显(P<0.05~0.01)

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