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高三生物一轮复习 专题一 基因工程课件 新人教版选修3
特别提醒:基因治疗是治疗人类遗传病的根本方法,但由于尚未全面了解基因调控机制和疾病致病的分子机理,基因治疗只处于初期的临床试验阶段。 蛋白质具有复杂的空间结构,不同种类的蛋白质具有不同的结构和功能。 蛋白质结构的多样性是由构成蛋白质的氨基酸种类、数目、排列顺序以及蛋白质的空间结构来决定的,而其结构多样性的根本原因则是由于控制蛋白质合成的基因的多样性。 既然蛋白质的功能是由DNA决定的,那么要制造出新的蛋白质,就要改造DNA。所以蛋白质工程的原理应该是中心法则的逆推。它的基本途径是:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。 结合课本中插图(如图),可以较明确地说明这一点。 2.蛋白质工程与基因工程比较 项目 蛋白质工程 基因工程 区别 过程 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质 获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需蛋白质 定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品(基因的异体表达) 结果 生产自然界没有的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质 联系 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因修饰或基因合成实现 热点突破 题型一 基因工程操作的基本工具 典例1 如图是含某目的基因的DNA片段,据图回答下列问题。 (1)根据图示可知,若用 EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶切割,则此DNA片段可有__________个限制酶切割位点,切割后共有__________种__________个切割末端。 (2)EcoRⅠ限制酶切割后形成的末端是__________末端,在图中用笔标出切割部位。 (3)如果EcoRⅠ限制酶切割形成的目的基因片段要导入受体细胞,一般需要________作载体。其应具备的特点有:_______、________、_______。 (4)E·coliDNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中__________(填字母)部位的化学键。 (5)若某限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。请画出质粒和目的基因两侧分别被限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割形成黏性末端的过程。 技巧点拨:上题第(5)题易漏画目的基因,而只是画出两侧的DNA序列。 题型二 基因工程的操作过程分析 典例2 已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。 SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗,开展了前期研究工作,其简要的操作流程如下: (1)实验步骤①所代表的反应过程是__________。 (2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和__________酶,后者的作用是将用限制性内切酶切割的__________和__________连接起来。 (3)如果省略步骤②而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其原因是S蛋白基因在大肠杆菌中不能__________,也不能__________。 (4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性,可用__________与__________进行抗原-抗体特异性反应实验,从而得出结论。 (5)步骤④和⑥的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列__________(填“相同”或“不同”),根本原因是__________。 解析:(1)利用RNA获取DNA,一般采用逆转录的方法,在这一过程中需要逆转录酶;(2)目的基因与载体结合,先用限制性内切酶在目的基因和载体上切出相同的黏性末端,将目的基因片段插入运载体的切口处,再加入适量DNA连接酶,将黏性末端连接起来;(3)选择性扩增后得到的含有遗传信息的DNA片段(S蛋白基因),直接导入大肠杆菌细胞内,在不与其DNA整合的情况下,不进行复制和转录,得不到相应的蛋白质;(4)通过大肠杆菌合成的S蛋白,结构和功能可能会发生变化,可与人体内产生的抗S蛋白的抗体进行抗原-抗体特异性反应,以此进行检测;(5)各种生物都共用一套遗传密码,因此转入相同的目的基因,表达出的蛋白质一般应相同。 答案:(1)逆转录 (2)DNA连接 载体 S蛋白基因 (3)复制 合成S蛋白基因的mRNA (4)大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清 (5)相同 表达蛋白质所用的基因相同且共用一套遗传密码 题型三 基
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