普洱茶固态发酵过程中微生物群落结构及变化-遥感技术与应用.pdf

142 2013, Vol.34, No.19 食品科学 ※生物工程 普洱茶固态发酵过程中微生物群落结构及变化 1 1 2 3 1,* 杨晓苹 ，罗剑飞，刘 昕，刘通讯 ，林炜铁 (1.华南理工大学生物科学与工程学院，广东 广州 510006 ；2.阿德莱德大学分子和生物医学科学学院， 澳大利亚 阿德莱德 5000 ；3.华南理工大学轻工与食品学院，广东 广州 510640) 摘  要：以少量茶叶发酵制备普洱茶过程中的茶叶样品为研究对象，采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR- DGGE)技术分别对茶叶中细菌16S rRNA和真菌18S rRNA 的PCR产物进行分离，根据基因指纹图谱分析群落结构及 其动态变化过程，并对细菌和真菌的主要优势条带进行克隆、测序、构建系统发育树。结果表明：茶叶堆表和堆芯 的微生物群落结构差异小；在发酵过程中，细菌和真菌的种类均在二翻时迅速增加，群落结构产生显著变化；而后 不同种类的数量随着发酵时间的推进有规律地增加或减少，最后趋于稳定。黑曲霉是发酵前期的优势菌种，芽孢杆 菌属和Arxula adeninivorans 是普洱茶发酵后期的主要优势菌群。 关键词：普洱茶；16S rRNA ；18S rRNA ；聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE) ；群落结构 Microbial Community Structure and Change during Solid Fermentation of Pu-erh Tea 1 1 2 3 1,* YANG Xiao-ping ，LUO Jian-fei ，LIU Xin ，LIU Tong-xun ，LIN Wei-tie (1. College of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China ； 2. School of Molecular and Biomedical Science, University of Adelaide, Adelaide 5000, Australia ； 3. College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract ：Polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis (PCR-DGGE) was used to separate the bacterial 16S rRNA and fungal 18S rRNA PCR products, and DGGE profiles were applied to analyze the bacterial and fungal community structures and their changes during the fermentation of Pu-erh tea. Dominant DNA bands on the DGGE gels were recovered and cloned into E. coli , and the targeted clones were sequenced. Based on the blasted nucleotide sequences, bacterial 16S rRNA and fungal 18S rRNA Neighbor-Joining phylogene