磁共振成像对血管内皮生长因子基因治疗犬脑梗塞有效性评价的实验的分析研究.pdf

中文摘要 磁共振成像对血管内皮生长因子基因治疗 犬脑梗塞有效性评价的实验研究 摘 要 第一部分：一种不开颅的微创家犬局灶性脑梗塞动物 模型。 研究目的：建立一种适合医学影像学相关研究的家 犬局灶性脑梗塞疾病模型。 ／方法：10只健康成年家犬，分为手术组7只和假手 术对照组3只。右侧股动脉穿刺插管，在DSA透视下将 导管尖端经腹主动脉、主动脉弓选择到一侧颈内动脉， 注入直径约8009m的与造影剂充分混合的聚氯乙烯酒精 (PVA)颗粒栓子3～5枚。假手术对照组除不注入栓 子外，其他操作步骤与手术组完全相同。分别从DSA造 影、MR弥散加权成像(DWI)和灌注加权成像(PWI)、 神经功能评分、形态学检查等方面评价模型效果。 结果：次日动物苏醒后表现出从轻度半身不遂到死 亡不同程度的神经功能缺陷(2只动物于当日夜死亡)。 4只手术组动物出现同侧大脑中动脉区的DWI高信号和 PWI的灌注下降，DSA造影出现相应部位的血管走行中 断。光镜观察可见病变组织水肿，神经元固缩、核溶解 等缺血表现。另3只动物于同侧半球大脑前动脉、大脑 后动脉合并或单独出现缺血表现。假手术组动物形态拳／ MR、DSA检查及神经功能评分均未见异常改变。尸 结论：该方法建立的家犬局灶性脑梗塞疾病模型创 ～ 中文摘要 伤小、操作简单、动物存活率高，适于影像学及其他亚 急性慢性为主的实验研究。 第二部分：Mm对VEGF基因治疗脑梗塞效果的评 价． 也 ， 研究目的：恤管内皮细胞生长因子(VEGF)被认为 可以通过强大的促毛细血管新生作用促使梗塞后侧枝循 环重建，对脑梗塞临床治疗具很大潜力。／为促使VEGF 临床应用研究的进展，拟用无创性的可多次重复进行的 MR检查结合MR新技术弥散加权成像(DWI)年F1灌注加权 成像(PWi)追踪观察VEGF质粒对局灶性脑梗塞家犬疾病 模型的治疗效果，并与形态学检查和免疫组化染色结果 相对照。 f方法：18只健康成年家犬，股动脉插管，选择颈内 动脉推注栓子到达大脑中动脉制成脑梗塞动物模型。依 处死时间不同(次日、一周和二周)随机分成3组，每 组动物数为3只、7只(3只对照)和8只(3只对照)。 组内又依处理因素不同分成2个亚组，实验组颅骨打孔 生理盐水。手术次日处死的3只动物全部为生理盐水对 照组。 手术结束后进行MR扫描，每间隔1小时重复一次 直至术后4小时。扫描序列为T1WI、T2WI、3D— 周重复上述序列扫描，并参照Purdy的方法法对动物进 行神经功能缺陷评分。动物处死前经心脏灌注固定，以 中文摘要 MR图像为依据选择病变部位分别进行耻染色、免疫组 化染色、并进行电镜观察。 MR图像经工作站后处理选择两侧半球参数相除得 的梗塞体积变化作为MR评价指标。方差分析法分析不 同时间不同处理组之间的差异。 根据CD34免疫组化染色结果计数每高倍视野下的 毛细血管数，根据VEGF免疫组化染色结果计数免疫反 应阳性细胞数，反应局部VEGF蛋白的含量，用方差分 析法分析组间结果的差异。将免疫组化结果与M对表现 对照进行相关分析。 结果：术后l小时DWI可见到梗塞区明显的高信号， 且随时间的延长信号逐渐增高。HE染色显示病变区水 肿，神经细胞核固缩，细胞结构不清等缺血表现。电镜 观察发现线粒体和尼氏体肿胀，结构模糊，病变区可见 大量的脂褐素颗粒。后续MR扫描显示病变区ADCr由 超急性期的下降开始呈上升趋势，其中对照组T2r、ADCr 在l～2周时明显升高，2周时两组之间存在显著差异(P =0．032．0．006)。梗塞后病变区血流动力学的改变表现