天然丝素蛋白的酶水解的分析研究.pdf

摘要 本文在比较几种蛋白酶水解丝素效果的基础一L，用茚三酮比色法 和SDS—PAGE凝胶电泳法，i羊细研究厂水解效果最好的弹性蛋白酶水 解丝素过程中，温度、pH值、酶用量、底物浓度以及水解时间对反 应速度、水解程度的影响，确定了酶促反应的～些催化特性：最适温 度为45℃；最适pH为8．5；动力学常数K。值为4．3rng／rnl。 另外，用氨基酸分析、红外光谱、热分析以及X衍射等手段对 厂 酶解产物的组成和结构特点作了分析。(结果表明，丝素经弹性蛋白酶 ＼ 水解后，产生少量的沉淀(Cp)，这部分分子以9折叠构象为主，呈 紧密的结晶聚集态；水溶部分(cs)与再生丝素溶液相似，是完全无 规卷曲的结构。同时，两部分氨基酸的组成是有较大差异的，简单氨 关键词 丝素 弹性蛋白酶 酶水解 水解产物 ’：羔：兰型】型型：型”：! 塑竺 Abstract 0nthebasis ofeffect 011 ofsilkfibroin comparison hydrolysis by was selectedasthemost pl‘oteinases，elastase effective tobe enzyme studiedindetail．Withthemethods ofninhydrin and colorimetry SDS—PAGE effectsof gel electrophol‘esis，the influencingparameters， including dose，substrate temperature，pHvalue，enzyme concentration， and timewere indicatesome hydrol37tic investigated．Results hydrolytic chal‘acteristics，the and valueis45℃．8．5 optimum temperaturepH value is Km respectively，kinetic4．3mg／m1． and Moreo＼7er，the structureof were composition hydrol3，s