骆驼刺中黄酮类化合物提取工艺探究.docVIP

骆驼刺中黄酮类化合物提取工艺探究 　 作者：苏小川，黄昀，赵永昕，阿吉艾克拜尔·艾萨 【摘要】 　　目的筛选出提取骆驼刺中黄酮类化合物的最佳工艺。方法采用正交实验，考察乙醇浓度（A）、料液比（B）、提取时间（C）、提取次数（D）4个因素对骆驼刺（Alhagi sparsifolia shap.）中总黄酮提取率的影响，用紫外分光光度计法进行检测。结果最佳提取工艺为：溶剂为40%乙醇，料液比1∶20，提取时间1.5h，提取3次。结论该工艺条件提取率高且稳定。 【关键词】 骆驼刺 总黄酮 正交实验 芦丁 　　Abstract：ObjectiveTo select an optimal extraction process of the total flavonoids from Alhagi sparsifolia Shap.. MethodsThe orthogonal design was carried out to investigate the effects of concentration of extractant（A），dosage liquor（B），extraction time（C） and extraction times（D） on the content of flavones in Alhgi sparsifoua shap.. ResultsThe optimum extraction condition was 40% ethanol, solid-liquid ratio 1∶20, 1.5h for 3 times. ConclusionThe optimal extraction process of the total flavonoids in Alhagi sparsifolia Shap. is stable. 　　Key words：Alhagi sparsifolia Shap.; Total flavonoids; Orthogonal design; Rutin 　　骆驼刺Alhagi sparsifolia Shap.是豆科（Leguminosae）骆驼刺属植物［1］，广泛分布于我国的内蒙古、甘肃、青海和新疆等地，为维吾尔医常用药材，在民间有悠久的应用历史，用于治疗风湿和癌症。现代药理学研究证明骆驼刺乙醇提取物有抑制移植性肝肿瘤细胞生长的作用［2］。 　　黄酮类化合物广泛存在于生物体内，具有多方面的生理活性，例如心血管系统活性、抗菌及抗病毒活性、抗肿瘤活性、抗氧化、抗炎镇痛、保肝等［3］。我们在研究骆驼刺Alhagi sparsifolia Shap.中的化学成分时发现骆驼刺中含有大量的黄酮类化合物，但骆驼刺中黄酮类化合物的提取工艺尚无文献报道。本实验以植物中总黄酮的含量为考察指标，采用回流提取法，用正交实验优选提取条件，用分光光度法对骆驼刺中的总黄酮含量进行了测定。 　　1 材料与仪器 　　1.1 原料及试剂骆驼刺采自新疆托克逊，经中国科学院新疆生态与地理研究所生物标本馆沈观冕研究员鉴定为骆驼刺Alhagi sparsifolia shap.全草。取干燥的骆驼刺粉碎，过6目筛备用。NaNO2，Al(NO3)3，NaOH，无水乙醇均为分析纯。芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所。 　　1.2仪器DZTW型调温电热套（北京市用光明医疗仪器厂），岛津UV-2550型紫外分光光度计，JD200-3电子天平（沈阳龙腾电子有限公司），DENVILLE 260D高速离心机。 　　2 方法 　　2.1 标准曲线的绘制对照品溶液的制备：芦丁对照品在120℃下干燥至恒重，精密称取25 mg，置50 ml容量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。精密量取20 ml，置50 ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得（1 ml中含无水芦丁0.2 mg）。 　　标准曲线的制备：精密称取对照品溶液1，2，3，4，5，6 ml分别置25 ml容量瓶中，各加水至6 ml，加5%亚硝酸钠溶液1 ml，混匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠溶液10 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，以相应的试剂为空白，用紫外分光光度法，在500 nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，建立标准曲线，回归方程为Y=0.011 63X - 0.012 14，其线性范围为8～48 mg/L，相关系数r=0.999 5。 见表1。表1 标准曲线数据（略） 　　2.2 测定波长的选择取标准溶液1 ml，按“2.1”项下操作，置于UV-2550型紫外分光光度计上在200～600 nm范围进行扫描，总黄酮反应产物在500 nm波长处有最大吸