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鹅掌草根茎主要皂苷成分含量测定 　 作者：韩林涛，黄芳，周云云，余尚工，方念伯 【摘要】 目的分析测定鹅掌草中主要皂苷成分之一anhuienoside E的含量。方法采用C18柱(沃特斯公司，Xterra RP18 3.5 μm，4.6 mm×150 mm)，流动相为甲醇-水(58∶42)，流速1 ml/min，检测波长209 nm。结果皂苷anhuienoside E在2.14～10.70 μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6)，平均回收率为100.6% ，RSD=1.28% (n=6)。结论该方法简便，灵敏，重复性好，可作为鹅掌草中主要皂苷成分anhuienoside E的含量测定方法。 【关键词】 Anhuienoside E； 鹅掌草； 高效液相色谱 　　Abstract：ObjectiveTo determine anhuienoside E in Rhizome of Anemone flaccida by HPLC. MethodsAnhuienoside E was separated on Xterra RP18 3.5μm column(4.6 mm×150 mm) with a mobile phase of methanol-water(58∶42) and detected at a wavelength of 209 nm．ResultsThe calibration curve was linear in the range of 2.14～10.70μg(r=0.999 6). The average recovery rate was 100.6% and RSD=1.28% (n=6). ConclusionThe method is simple， sensitive and precise. It can be used for the determination of anhuienoside E in Rhizome of Anemone flaccida. 　　Key words： Anhuienoside E； Anemone flaccida； HPLC 　　鹅掌草Anemone flaccida Fr. Schmidt系毛茛科银莲花属多年生植物。该属植物约有150种，世界各大洲均有分布，我国有54种，除海南省外，其它各省均有分布［1，2］，其中鹅掌草在湖北省西部有广泛的分布［1］。该属植物可作药用的有竹节香附A. raddeana、鹅掌草A. flaccida、草玉梅A. rivularis等数种，多以根或根茎入药，具有祛风湿、消肿解毒等功效［1］。现代药理研究表明， 鹅掌草根茎(又名地乌)有抗肿瘤、抗炎、解热镇痛、镇静、抗惊厥等作用，其有效成分为三萜皂苷类 ［2～4］。本文建立了HPLC法测定鹅掌草中分离得到的主要皂苷成分anhuienoside E含量，以后将陆续报道其他含量较高皂苷类成分的含量测定，目的是为进一步开发鹅掌草提供理论和实验依据，使得湖北省西部地区广泛分布的这一植物资源得到更科学合理的利用。 　　1 仪器及试药 美国Agilent 1100serious高效液相色谱仪：四元泵、在线脱气机、柱温箱、可变波长紫外检测器；上海科导超声仪器有限公司BD-2型超声波清洗器(功率：450W，频率：59KHz)；赛多利斯公司BP211D型分析天平。所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。对照品由湖北省中药标准化工程技术研究中心提供［制备色谱分离得到，并经UV，IR，NMR，MS和文献对照［4］，检定为anhuienoside E，即3-O-α-L-吡喃鼠李糖 (1→2) -β-D-吡喃葡萄糖-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖 (1→4) -β-D-吡喃葡萄糖 (1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷，经HPLC按峰面积归一化法检查纯度为99.5%］。鹅掌草根茎采集自湖北省五峰县，中国科学院武汉植物园袁晓博士鉴定，凭证标本保存于湖北中医学院中药标本馆(No。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件C18柱(Waters公司，Xterra RP18 3.5 μm，4.6 mm×150 mm)，流动相：甲醇-水(58∶42)，流速：1 ml/min，柱温：40℃，检测波长：209 nm。进样量：对照品溶液和供试品溶液各5 μl。理论塔板数以anhuienoside E峰计不低于2 000。结果见图1～2。 　　2.2 对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的皂苷anhuienoside E对照品10.70 mg，置10 ml量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得。 　　2.3 供试品溶液的制备取鹅掌草根茎粉末0.15